[发明专利]用于检测结核分枝杆菌复合群或分枝杆菌属的组合物和使用所述组合物通过多重实时PCR来同时检测结核分枝杆菌复合群和分枝杆菌属的方法

权利要求书

1.一种用于检测结核分枝杆菌复合群(Mycobacterium tuberculosiscomplex)或分枝杆菌属(Mycobacterium genus)的组合物，其包含：选自由以下各者所组成的群组的至少一种引物：含有如SEQ ID NO：1中所述的碱基序列的引物；含有如SEQ ID NO：2中所述的碱基序列的引物；含有如SEQ ID NO：3中所述的碱基序列的引物；和含有如SEQ ID NO：4中所述的碱基序列的引物。

2.根据权利要求1所述的组合物，其进一步包含内对照引物。

3.根据权利要求2所述的组合物，其中所述内对照引物是植物源基因-特异性引物。

4.根据权利要求3所述的组合物，其中所述植物源基因是凝集素基因并且所述植物源基因-特异性引物为含有如SEQ ID NO：28中所述的碱基序列的引物或含有如SEQ ID NO：29中所述的碱基序列的引物。

5.一种用于检测结核分枝杆菌复合群的组合物，其包含含有如SEQ IDNO：1中所述的碱基序列的正义引物和/或含有如SEQ ID NO：2中所述的碱基序列的反义引物作为对结核分枝杆菌复合群的IS6110基因具有特异性的引物。

6.一种用于检测分枝杆菌属的组合物，其包含含有如SEQ ID NO：3中所述的碱基序列的正义引物和/或含有如SEQ ID NO：4中所述的碱基序列的反义引物作为对分枝杆菌属的rpoB基因具有特异性的引物。

7.根据权利要求6所述的组合物，其中对所述分枝杆菌属的所述rpoB基因具有特异性的所述引物形成长度小于100bp的PCR扩增产物。

8.一种用于检测结核分枝杆菌复合群或分枝杆菌属的组合物，其包含：

选自由以下各者组成的群组的至少一种探针：含有如SEQ ID NO：5中所述的碱基序列的探针；含有如SEQ ID NO：6中所述的碱基序列的探针；和含有如SEQ ID NO：7中所述的碱基序列的探针。

9.根据权利要求8所述的组合物，其中所述探针在其5′端和3′端标记有荧光染料，并且5′-标记的荧光染料(报道剂)和3′-标记的荧光染料(淬灭剂)彼此间显示出相互干扰。

10.根据权利要求9所述的组合物，其中所述5′-标记的荧光染料选自由以下各者组成的群组：6-羧基荧光素(FAM)、六氯-6-羧基荧光素(HEX)、四氯-6-羧基荧光素和花青-5(Cy5)，并且所述3′-标记的荧光染料是6-羧基四甲基-罗丹明(TAMRA)或黑洞淬灭剂-1，2，3(BHQ-1，2，3)。

11.一种用于通过实时PCR分析结核分枝杆菌复合群或分枝杆菌属的组合物，其包含：

选自由以下各者组成的群组的至少一种引物：含有如SEQ IDNO：1中所述的碱基序列的引物；含有如SEQ ID NO：2中所述的碱基序列的引物；含有如SEQ ID NO：3中所述的碱基序列的引物；和含有如SEQ ID NO：4中所述的碱基序列的引物；和

选自由以下各者组成的群组的至少一种探针：含有如SEQ IDNO：5中所述的碱基序列的探针；含有如SEQ ID NO：6中所述的碱基序列的探针；和含有如SEQ ID NO：7中所述的碱基序列的探针。

12.根据权利要求11所述的组合物，其进一步包含内对照引物和内对照探针。

13.根据权利要求12所述的组合物，其中所述内对照引物是含有如SEQID NO：28中所述的碱基序列的正义引物或含有如SEQ ID NO：29中所述的碱基序列的反义引物，并且所述内对照探针是含有如SEQ IDNO：30中所述的碱基序列的探针。