[发明专利]分离的发光蛋白mtClytin及其用途

说明书

本发明是申请号为200480033782.3、申请日为2004年9月3日的 发明专利申请的分案申请。

技术领域

本发明涉及发光蛋白mtClytin，其核苷酸和氨基酸序列以及发光蛋 白mtClytin的活性和用途。

背景技术

发光蛋白

活生物体产生光的现象被称作生物发光。它是细胞中生化反应的结 果，所述反应以光量子的形式发出化学能(化学发光的方法被称作冷发 射)。以该方式产生的光是单色的，因为它的发出与离散电子传递相关， 其可通过次级发光染料(例如Aequora属的发光水母中的荧光蛋白)易 位进入较长波长的光谱区。

生物发光具有生物学功能的多样性：在200至1000m(Mesopelagial) 之间的海洋中层带，大约90％的活生物体发冷光。此时，发光信号被用 于吸引配偶，欺骗和作为诱饵。萤火虫(Glowworms)以及萤火虫 (fireflies)也使用光信号寻找配偶。另一方面，细菌、真菌和单细胞藻 类发光的意义不明。其被假定用于协调大种群中的众多单独个体或表示 生物钟的类型。

许多腔肠动物具有生物发光性(Morin等，1974)。这些生物发出 蓝色或绿色光。水母发光蛋白(源自Aequoria victoria(Shimomura等， 1969)且于1962年被鉴别出的首个产生光的蛋白)作为分离的蛋白发 出蓝光，而并非如经Aequoria victoria表象观察到的绿光。随后从该 Aequoria victoria中分离出绿色荧光蛋白(GFP)，其(作为被水母发光 蛋白活化的结果)使水母在表型上呈现绿色(Johnson等，1962；Hastings 等，1969；Inouye等，1994)。同样已被鉴定和描述的其它发光蛋白可 以为clytin(Inouye等，1993)、mitrocomin(Fagan等，1993)和obelin (Illarionov等，1995)。

表1：某些发光蛋白概述。表中给出了名称，已从中分离出该蛋白 的生物体，和数据库登录的识别号(Acc.No.)。

名称 生物体 识别号 Obelin 曲膝薮枝螅(Obelia geniculata) AAL86372 Clytin Clytia gregaria CAA49754 水母发光蛋白 大型多管水母(Aequorea macrodactyla) AAK02061 水母发光蛋白 细小多管水母(Aequorea parva) AAK02060 Mitrocomin Mitrocoma cellularia AAA29298 Pholasin Pholas dactylus AAM18085 ？ 南鱿(Symplectoteuthis oualaniensis) AX305029