[发明专利]CTLA4lg及其衍生物用于抗细菌

说明书

技术领域

本发明涉及已知物质的新药用。具体地，本发明涉及CTLA4Ig或 CTLA4Ig衍生物在治疗细菌中的应用和在制备抗细菌药物中的新应用。

背景技术

CTLA4Ig

活化的T细胞在许多疾病及病理过程中起着十分重要的作用。研究表 明，T细胞必须在第一信号(TCR/MHC-Ag)及辅助刺激信号共同作用下才 能完全活化(^{1，2，3，4}，见后附参考文献列表。以下同)。前者是T淋巴细胞 活化的基础，并决定了T细胞反应的特异性；后者是T细胞活化的必要条 件，两者缺一不可。缺乏或阻断辅助刺激信号，将会引起T细胞的无反应 性(anergy)或细胞凋亡(apoptosis)及克隆丢失(deletion)^{(2，3，4，5)}。到现在为 止已发现多种辅助刺激信号系统，如B7/CD28-CTLA4系统、CD40/ CD40L系统、CD95(Fas)/Fas L、CD2/LFA3、ICAM1/LFA1、VCAM1/VLA4 系统等^{(6，7，8，9)}。后者为T细胞膜上表面分子，前者为表达于APC膜上的相 应配体，二者相互作用发挥辅助刺激作用。研究发现，在所有的辅助刺激 信号途径中，B7/CD28-CTLA4系统被认为是最重要的辅助刺激信号系统 (6)。

CTLA4(Cytotoxic Lymphocyte Antigen 4，CTLA4)是细胞毒性T淋巴细 胞中发现的第四种特异性抗原基因编码的糖蛋白。最早由Brunt等在筛选 小鼠CTL细胞cDNA扣除文库时发现其编码基因⁽¹⁰⁾。在人类，其基因位 于2号染色体长臂33带(2q33)(CD28基因也同在此位点)，单拷贝，长约 4Kb，含有4个外显子和3个内含子。外显子1含108bp，编码一段含疏 水氨基酸的前导链，外显子2含348bp，编码CTLA4V区116个氨基酸， 外显子3含111bp，编码37个氨基酸，包括胞外一部分氨基酸、跨膜区疏 水氨基酸和胞浆内功能区开始几个氨基酸，外显子4有102bp，编码CTLA4 胞浆段大部分氨基酸，其后是3’非编码区的1150bp，含有约60个AT重 复序列辊，可能与控制mRNA的稳定性有关⁽¹¹⁾。CTLA4是一种跨膜糖蛋 白，除信号肽及终止信号外，人CTLA4由187个氨基酸组成，第109至 111位为糖基化位点。由膜外区166个氨基酸、跨膜区37氨基酸和胞浆区 34个氨基酸组成。主要表达在活化T细胞膜上，并发现，其表达在刺激 后48小时左右达高峰⁽¹²⁾。CTLA4可和CD28分子竞争性抑制与APC膜上 的B7分子结合，从而阻断T淋巴细胞活化中的B7-CD28辅助信号途径， 进而阻断T细胞的活化。另一方面，当T细胞CTLA4分子与B7分子结 合后，致CTLA4胞内段磷酸化，产生负调信号，从而阻断T淋巴细胞活 化及功能，因而认为CTLA4是一种T细胞活化的负性调节因子⁽¹³⁾。

CTLA4胞外段的主要功能是与其相关配体B7分子结合，现在已发现 三种以上的B7分子，分别命名为B71(CD80)、B72(CD86)、B73等^(14，15)。 但CTLA4胞外区与B7分子的结合力比CD28大20至100倍⁽¹⁶⁾。跨膜区 是将胞外区被B7分子结合的信号传向细胞内。CTLA4胞内区是将外来信 号转变成细胞负调信号，而降低T细胞的功能。所以，CTLA4至少通过 两条途径发挥着下调T细胞功能的作用^(17，18)。一是通过CTLA4胞外区和 CD28竞争性结合，而抑制抗原提呈细胞上的B7分子与T细胞膜上的CD28 分子结合，从而使阻断T细胞活化所必须的B7-CD28辅助信号途径，致 使T细胞功能下调。另一方面，当CTLA4与B7分子结合后，直接产生 负调信号，同样下调T细胞功能。