[发明专利]促造血的药物组合物及其制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种促进造血的药物组合物以及制备该药物组合物的方法。本发明还涉及该药物组合物在制备用于治疗造血功能受损状态的药剂中的用途。 

背景技术

造血是人体生命活动的重要部分。成年动物的造血组织主要位于骨髓中。在生理条件下，造血过程是造血干细胞(HSC)经增殖、分化、直至形成各种成熟血细胞的动态过程。临床上多种常见的血液系统疾病，例如再生障碍性贫血、多发性骨髓瘤、骨髓增生异常综合症等，以及放疗和化疗引起的骨髓损伤都会导致骨髓造血功能受到抑制或衰竭，给机体健康带来严重危害。 

造血干细胞移植(HSCT)能够促进造血重建，在一定程度上恢复骨髓的造血功能，已经成为诸如白血病、多发性骨髓瘤、再生障碍型贫血及一些遗传性贫血等血液系统疾病的重要治疗手段。近年来，HSCT还被逐渐用于乳腺癌、神经母细胞瘤、卵巢癌等癌症放疗或化疗后的支持治疗。已知其他一些电离辐射损伤，比如急性放射病造成的骨髓抑制也可通过造血干细胞移植来治疗。本发明人先前的研究表明给患急性放射病的动物移植转染了细胞因子基因的造血干细胞能有效地促进骨髓造血重建[张勇等人，“中华放射医学与防护杂志”第28卷，第14-17页]。 

但是，由于细胞扩增、转染效率、体内移植活力等问题的影响，单纯的造血干细胞移植对骨髓造血障碍的治疗效果并不令人满意。 

中药制剂由于其较高的安全性，也被用于治疗一些血液系统疾病。其中使用较多的中药成分为皂矾。皂矾的主要成分是硫酸亚铁，还含有铜、砷、钴等刺激骨髓造血的微量元素。以皂矾为主药的皂矾复方 丸常用于辅助治疗某些造血障碍型疾病，对辐射损伤动物的造血功能也有一定的改善作用[肖扬等人，“中药新药与临床药理”，第15卷，第387-389页]，但存在缓解慢、起效慢、治愈率低的缺点。 

发明内容

本发明的目的在于提供一种药物组合物，该组合物包含造血干细胞和皂矾以及药学上可接受的介质，具有显著促进造血重建、恢复骨髓造血功能的作用。 

本发明的另一目的在于提供一种药物组合物的制备方法。 

本发明的再一目的在于提供一种药物组合物在制备治疗造血功能受损状态的药剂中的用途。 

在本发明的实施方案中，所述造血干细胞为CD34⁺造血干细胞。在本发明优选实施方案中，该CD34⁺干细胞为CD34⁺脐带血干细胞。 

在本发明另一实施方案中，所述造血干细胞可以是导入了表达载体的造血干细胞，其中所述表达载体携带至少一种细胞因子基因。 

在本发明的优选实施方案中，所述表达载体携带的细胞因子选自Flt3配体(Flt3 ligand，FL)、白介素-3(IL-3)或其组合。更优选地，所述表达载体为pIRES2-EGFP-IL-3、pIRES2-EGFP-FL或其组合或pIRES2-EGFP-FL-IL-3。最优选地，所述载体为pIRES2-EGFP-FL-IL-3。 

在本发明的一个实施方案中，药物组合物中的药学上可接受的介质选自缓冲液、生理盐水、细胞培养基、平衡盐溶液或其组合。 

在本发明的实施方案中，本发明的药物组合物的制备方法包括：分离纯化造血干细胞并将其重悬在药学上可接受的介质中；将皂矾溶于药学上可接受的介质中；将上述细胞重悬液与皂矾溶液混合。 

在本发明的另一实施方案中，本发明的药物组合物的制备方法包括：分离纯化造血干细胞；将携带细胞因子的表达载体导入所述干细胞，筛选转染阳性细胞；将所述转染阳性细胞重悬在药学上可接受的介质中；将皂矾溶于药学上可接受的介质中；然后将上述细胞重悬液与皂矾溶液混合。 

在本发明提供的药物组合物中，造血干细胞和皂矾具有协同促进造血的作用，使该药物组合物在造血重建中具有起效快、有效率高、治愈率高的优点。 

在本发明的实施方案中，所述药物组合物与单纯的造血干细胞移植或单独给予皂矾相比，显著提高了个体的生存率及外周血细胞的数量，显示了本发明的组合物在治疗造血功能受损状态中的优势。尤其是，本发明的pIRES2-EGFP-FL-IL-3比单独使用pIRES2-EGFP-IL-3、pIRES2-EGFP-FL或其组合显示出更好的效果。 

附图简要说明 

图1显示IL-3的PCR产物电泳图。第1泳道为分子量标志物，第2、3泳道为IL-3的PCR产物。