[发明专利]人血液样本中脂类分子含量测定及其结直肠癌诊断试剂盒制备与应用

说明书

技术领域

本发明提供了一种测定个体血液样本中多种脂类分子水平的方法，这些脂类分子包括：溶血磷脂酰胆碱(LPC)的各种亚型(14:0LPC、16:0LPC、18:0LPC、20:0LPC、22:0LPC、18:1LPC、18:2LPC、20:4LPC、22:6LPC，采用不饱和有机化合物的阿拉伯数字编号定位，冒号后数字表示双键位置)、神经鞘氨醇磷酸胆碱(SPC)、血小板活化因子(L-PAF)，鞘磷脂(SM，包括SM703和SM731，其中703与731分别指两种亚型的分子量)。我们发明了一种脂类分子的生物标记组合，将其制备成试剂盒，以人体血液为样本，根据脂类标记分子的含量测定和综合分析，确定个体患有结直肠癌的可能性，以此进行结直肠癌的辅助检测。

背景技术

结直肠癌(CRC)是威胁人类健康的主要癌症之一，是常见的恶性肿瘤。近20多年来，世界上多数国家结直肠癌发病率和死亡率处于上升趋势。据世界卫生组织(WHO)Parkin博士报告，2002年结直肠癌新病例102.3万，死亡52.9万，分别比2000年增加了8.3％和7.5％，其发病率和死亡率分别居所有癌症的第三位和第四位。在现有癌症患者中，结直肠癌占了11.4％，居第二位。我国情况亦相似，以上海为例，1973--1993年结直肠癌发病率每年递增4.2％，比全球平均递增速度还要高一倍多。1990--1992年我国十分之一人口抽样调查表明，结直肠癌平均调整死亡率为4.54/10万，比1977年全国结直肠癌死亡率3.54/10万增加了28.2％，居所有癌症死亡率的第五位。最近据WH0报告的资料，我国结直肠癌死亡率2005年比1991年增加了70.7％，年均增加4.71％。

中国患者的发病年龄多在40—60岁，中位发病年龄比欧美约提前10年，高峰在50岁左右，但30岁以下的结直肠癌患者也比欧美多见。由于结直肠癌起病隐匿，症状的公众知晓度较低，许多患者在确诊时已经处于晚期。所以如果出现大便习惯与粪便性状的改变、腹痛或血便，应该及时就诊。结直肠癌的临床危险因素包括：年龄，大多在50岁以后；高蛋白高脂低纤维素饮食、吸烟和饮酒；家族史；患过大肠息肉；胆囊切除10年以上；重症溃疡性结肠炎多年不愈；接受过下腹部放射治疗；不明原因反复便血等等。

结直肠癌大约有25％的患者初次就诊时就已经发生转移。另外，高达50％的新诊断患者最终将进展为转移性结直肠癌，发生转移的患者能存活5年以上的不足5％，其最常见的转移部位是肝脏或其附近的淋巴结。转移性结直肠癌的医疗需求非常大，目前出现了西妥昔单抗这样第一个靶向作用于表皮生长因子受体的单克隆抗体，作为一种治疗结直肠癌且毒副作用远小于传统化疗药物的西妥昔单抗(爱必妥)，为伊立替康标准化疗失败的转移癌患者提供了一种新的治疗选择。

由于生存时间的长短取决于疾病诊断的时期，因此早期诊断极为重要。就全球而言，迄今结直肠癌的“三早”(早期发现、早期诊断、早期治疗)远不如人意。按理，根据目前外科技术和放化疗条件，结直肠癌完全可以争取到更好的治疗效果。临床资料表明，I期结直肠癌术后5年生存率达90％以上，II期为68.4％，III期为39.7％，IV期仅为10.2％。事实上，临床所见I期患者仅10％～20％，误诊、漏诊情况十分严重。文献资料统计结直肠癌的误诊率达60％～70％，约64％～85％的患者经历6个月以上才获得正确诊断，以致相当多患者失去治愈机会。在治疗上，虽然公认结直肠癌以手术治疗为主，但是手术治疗的效果在很大程度上取决于结直肠癌所处的时期。

许多研究表明，结直肠癌变是一个涉及原癌基因激活、抑癌基因失活等多基因、多阶段、多步骤渐进演化的积累过程。与结直肠癌相关的抑癌基因有p53、APC、DCC等，原癌基因有K-ras、c-myc等，并可能用于临床辅助诊断。

1.CD44