[发明专利]芫花中新的瑞香烷型二萜类化合物及其制备方法和用途

权利要求书

1.芫花中的瑞香烷型二萜类化合物，其特征在于：该类化合物有如下结构式：

 

GenkwanineⅡ                             GenkwaninⅢ

 

GenkwanineⅣ                              GenkwanineⅤ

 

  

 GenkwaninⅥ                                      GenkwaninⅦ   。

2.一种如权利要求1所述的芫花中的瑞香烷型二萜类化合物的制备方法，其特征在于：该方法为：

   选用瑞香科植物芫花Daphne genkwa.et zucc的干燥花蕾4000~6000g为原料，5~8倍量的体积比为60%~95%工业乙醇室温下冷浸提取15~20天，每24~48h小时减压浓缩一次，累计总浸膏500~600g，总浸膏用3~5L水混悬后，分别用氯仿，正丁醇以1：1的体积比进行萃取，萃取3~5次，得到的氯仿层干浸膏200~300g， 正丁醇层干浸膏200~300g，及浓缩后水液10~15L；

氯仿层浸膏进行快速减压柱色谱或常压柱色谱分离，沸程为30~60℃，或60~90℃的石油醚-丙酮50:1~2:1（V/V)混合溶剂梯度洗脱,每300~500ml体积为一馏分，共收集到40~50个馏分，经硅胶薄层层析检识，合并得到F1~F6的6个馏分，

馏分F4经氯仿-甲醇100:0~2:1或二氯甲烷-甲醇100:0~2:1混合溶剂梯度洗脱,得到F4-1~F4-6的6个馏分，F4-4分别经MCI gel柱色谱甲醇-水系统梯度洗脱除去叶绿素，硅胶柱色谱二氯甲烷-甲醇系统洗脱分离，C₁₈反相硅胶柱色谱以及制备高效液相色谱甲醇-水系统梯度洗脱分离，旋转蒸发仪回收溶剂得到白色粉末或透明状物质，化合物Genkwanin Ⅵ和Genkwanin Ⅶ；

馏分F6经氯仿-甲醇 80:0~2:1或二氯甲烷-甲醇 80:0~2:1混合溶剂梯度洗脱,得到F6-1~F6-4的4个馏分，F6-2分别经MCI gel柱色谱甲醇-水系统梯度洗脱除去叶绿素，硅胶柱色谱二氯甲烷-甲醇系统洗脱分离，C₁₈反相硅胶柱色谱以及制备高效液相色谱甲醇-水系统梯度洗脱分离，旋转蒸发仪回收溶剂得到白色粉末或透明状物质，化合物GenkwaninⅡ，GenkwaninⅢ，Genkwanin Ⅳ，GenkwaninⅤ。

3.根据权利要求2所述的芫花中瑞香烷型二萜类化合物的制备方法，其特征在于：该方法为：

所述的提取及萃取方法得到的氯仿层干浸膏经石油醚-丙酮系统50:1~2:1（V/V）混合溶剂梯度洗脱硅胶柱层析后得到馏分F1-F6；

馏分F3 经石油醚-丙酮 80:0~2:1或二氯甲烷-甲醇100:0~2:1混合溶剂梯度洗脱,得到F3-1~F3-7的7个馏分，馏分F3-3经MCI gel柱色谱以甲醇-水或乙醇-水系统梯度洗脱，收集20~50%洗脱的馏分，经C₁₈反相硅胶柱色谱以甲醇-水系统梯度洗脱，收集50~80%洗脱的馏分，经反相制备高效液相色谱分离，采用甲醇-水系统梯度洗脱，回收溶剂后，共得到化合物GenkwaninⅡ，GenkwaninⅣ，GenkwaninⅤ。

4.根据权利要求2所述的芫花中瑞香烷型二萜类化合物的制备方法，其特征在于：洗脱后的馏分中含有瑞香烷型二萜的部分氯仿-甲醇系统30:1~20:1展开，Rf值在0.1~0.8, 254nm紫外灯鉴别或显色剂鉴别，显色剂可以是10%硫酸显色剂，或10%硫酸偏矾酸铵-显色剂，或10%硫酸-香草醛显色剂。

5.如权利要求1所述的瑞香烷型二萜类化合物，其特征在于：所述的化合物可以与一种或多种药学上可接受的载体组成的药物组合，制成临床上可接受的剂型。

6.权利要求1所述的瑞香烷型二萜类化合在制备抗癌药物中的用途。

7.根据权利要求6所述的用途，所述的抗癌药物是针对HL-60人急性髓性白血病细胞癌症的药物。