[发明专利]一株好氧罗氏菌属菌株代谢产物胞外多糖、制法和用途无效
| 申请号： | 200910011853.4 | 申请日： | 2009-06-04 |
| 公开（公告）号： | CN101580550A | 公开（公告）日： | 2009-11-18 |
| 发明（设计）人： | 穆军;朱秀华;高琦;张翼;顾晓洁 | 申请（专利权）人： | 大连交通大学 |
| 主分类号： | C08B37/00 | 分类号： | C08B37/00;C12P19/04;C02F1/56;C02F1/62;C02F3/12;C12R1/01 |
| 代理公司： | 大连东方专利代理有限责任公司 | 代理人： | 贾汉生 |
| 地址： | 116028辽宁省大连*** | 国省代码： | 辽宁;21 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一株好氧罗氏菌属 菌株 代谢 产物 多糖 制法 用途 | ||
1.一株好氧罗氏菌属菌株Rothia sp.ZHT4-13 CGMCC No.2684代谢产物胞外多糖，用如下步骤对ZHT4-13菌株培养和代谢产物胞外多糖的提取：
(1)液体发酵培养基的制备：原料用量配方为：
调节pH为7.0～8.0；121℃，0.1MPa，20min高压灭菌后接入种子液；
(2)种子液培养：制作营养琼脂固体斜面，接种菌株ZHT4-13，培养箱恒温35±1℃培养1～2天；加入v/v＝1∶1的无菌水，15～35℃旋涡振荡2～6min使菌体细胞悬浮于水中，制成菌体细胞种子液备用；
(3)扩大发酵培养：每100ml发酵液接入0.1～0.4ml种子液，于30～35℃恒温，100～200r/min旋涡振荡培养3～4天；
(4)提取：将完成发酵培养的菌液于8000r/min离心10～25min，上层发酵液加入2～5倍体积的冷乙醇置于4℃冰箱中8～24h，9000～12000r/min离心10～25min取沉淀，真空干燥，得细胞外多糖粗制品；
(5)精制：上述样品加0.5～1体积水混匀，1000～2000r/min室温涡旋振荡1～5min，加入2～5倍体积冷乙醇沉淀，于4℃冰箱中静置8～24h，9000～12000r/min离心10～25min取沉淀，真空干燥得精制品。
2.如权利要求1所述的好氧罗氏菌属菌株Rothia sp.ZHT4-13 CGMCC No.2684代谢产物胞外多糖的制备方法，其特征在于工艺步骤为：
(1)液体发酵培养基的制备：原料用量配方为：
调节pH为7.0～8.0；121℃，0.1MPa，20min高压灭菌后接入种子液；
(2)种子液培养：制作营养琼脂固体斜面，接种菌株ZHT4-13，培养箱恒温35±1℃培养1～2天；加入v/v＝1∶1的无菌水，15～35℃旋涡振荡2～6min使菌体细胞悬浮于水中，制成菌体细胞种子液备用；
(3)扩大发酵培养：每100ml发酵液接入0.1～0.4ml种子液，于30～35℃恒温，100～200r/min旋涡振荡培养3～4天；
(4)提取：将完成发酵培养的菌液于8000r/min离心10～25min，上层发酵液加入2～5倍体积的冷乙醇置于4℃冰箱中8～24h，9000～12000r/min离心10～25min取沉淀，真空干燥，得细胞外多糖粗制品；
(5)精制：上述样品加0.5～1体积水混匀，1000～2000r/min室温涡旋振荡1～5min，加入2～5倍体积冷乙醇沉淀，于4℃冰箱中静置8～24h，9000～12000r/min离心10～25min取沉淀，真空干燥，得微生物絮凝剂MBF4-13精制品。
3.根据权利要求2所述的好氧罗氏菌属菌株ZHT4-13 CGMCC No.2684代谢产物胞外多糖的制备方法，其特征在于工艺步骤(2)种子液培养中生长初始pH值为7.0～8.0，生长温度为35±1℃。
4.如权利要求1所述好氧罗氏菌属菌株ZHT4-13 CGMCC No.2684代谢产物胞外多糖在废水处理中作为絮凝剂，用于固体悬浮物去除、重金属去除、染料脱色、活性污泥性能改善的用途。
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