[发明专利]一种酶解魔芋粉制备甘露寡糖的方法

权利要求书

1.产β-甘露聚糖酶的菌株，该菌株是芽孢杆菌(Bacillus sp.)MSJ-5，保藏号CCTCC NO：M208258，保藏单位：中国典型培养物保藏中心。

2.一种酶解魔芋粉制备甘露寡糖的方法，步骤如下：

(1)菌株斜面培养

产β-甘露聚糖酶的菌株芽孢杆菌(Bacillus sp.)MSJ-5，保藏号CCTCC NO：M208258，菌株斜面培养基：角豆胶1.0～1.2份，(NH₄)₂SO₄0.4～0.6份，K₂HPO₄·3H₂O 0.8～1.0份，琼脂1.2～1.5份，水100份，均为重量份；

(2)液体种子培养

液体种子培养基：酵母粉2.0～2.5份、麸皮1.0～1.2份、K₂HPO₄·3H₂O 0.8～1.0份、水100份，均为重量份，下同；灭菌，冷却，接种步骤(1)制得的芽孢杆菌Bacillus sp.MSJ-5的斜面菌种的菌悬液5～10份，28～30℃，摇瓶转速100～120转/分钟，培养20～24小时，得芽孢杆菌(Bacillus sp.)MSJ-5的液体种子，待用；

(3)β-甘露聚糖酶液的发酵制备

将步骤(2)制得的芽孢杆菌(Bacillus sp.)MSJ-5的液体种子按重量份5～8份加入到产酶培养基中进行发酵，发酵条件是30～32℃、27～34小时；

产酶培养基是：魔芋粉2.0～2.5份、酵母粉1.3～1.5份、豆粕1.0～1.2份、K₂HPO₄·3H₂O0.4～0.5份，pH 7.0～7.2；发酵制得的β-甘露聚糖酶液中β-甘露聚糖酶酶活为651±37U/ml；

(4)β-甘露聚糖酶酶解魔芋粉制备甘露寡糖

用去离子水配制魔芋粉液使魔芋粉含量为10～15mg/ml，将步骤(3)制得的β-甘露聚糖酶液按β-甘露聚糖酶10～15U/mg魔芋粉加入魔芋粉液中，pH7.0，50～70转/分钟搅拌，50～55℃，酶解20-30小时；酶解完毕，加温至100℃，保温5～10min使酶灭活，冷却后，10000rpm、室温离心5～10min，上清即为甘露寡糖液。