[发明专利]一种洋葱细胞质雄性不育SCAR标记及其应用

说明书

技术领域

本发明涉及一种SCAR标记及其应用，尤其涉及一种洋葱细胞质雄性不育SCAR标记及其应用，属于生物技术领域。

背景技术

洋葱(Allium cepa.L)，又称圆葱、葱头，百合科、葱属，二年生植物，已有5000多年的栽培历史，是世界上主要蔬菜种类，素有保健食品的美称，为我国主要的栽培品种和出口品种[Hou XL，Wu ZX.Cultivation，storage and processing of onion in China.In：the international symposyium on the utilization and processing of onions，1997，11：107-121]。据初步统计，我国洋葱种植面积达22.6万hm²(1999)，居世界第二位，总产量462.9万t，居世界第一位[苏保乐.创汇蔬菜出口指南.北京：中国农业科技出版社，1999：180-195]，2000年仅美国生产的洋葱产值就超过10亿美元，在蔬菜中列第三，其产值以每年5％的速度递增。洋葱不仅可鲜食，还大量用于加工制品，富含多种硫化物和糖类是其独特风味的主要成分，具有降低和预防血栓形成，降血脂、降血压、抗动脉硬化、预防心肌梗塞的作用，深受消费者的喜爱。

我国上世纪八十年代从日本、美国等国家引种杂交品种，其品质、产量及一致性都明显优于常规种[Berninger E.Contribution a I’etude de la sterilite male de I’oignon(Allium ceps L).Ann Amehor Plantes，1965，15：183-199]。自1925年Jones[Jones H，ClarkeA.Inheritance of male sterility in the onion and the production of hybrid seed.Proc Am SocHortic Sci，1943，43：189-194]首先在“意大利红”(Italian Red)品种中发现雄性不育株后，国外便开始了洋葱杂种优势利用的研究，在上世纪三十年代至四十年代成功的育成杂交品种，开创了蔬菜品种杂交育种的先例。目前的论文研究主要涉及传统标记、生化标记、分子标记。Havey等[Havey MJ.Identification of cytoplasms using the polymerase chainreaction to aid in the extraction of maintai

我国洋葱栽培历史较短，品种资源较匮乏。目前种植的品种可分为红皮、黄皮及白皮洋葱，栽培品种为开放授粉的常规品种，随着农业产业结构的调整，对洋葱优良品种的需求日益增加。由于洋葱品种选育的周期长，为普通蔬菜作物白菜、萝卜的2-4倍，生产上主要以品种引进和常规品种选育为主，缺少有自主知识产权的杂交一代品种，需要花费大量的外汇从国外进口种子，使出口创汇蔬菜生产的成本居高不下，要改变我国在洋葱育种领域上的落后局面，关键在于尽快广泛收集品种资源，走现代分子生物学技术与常规育种相结合的道路，缩短育种年限，加快分子标记辅助选择以及雄性不育系利用的研究。因此，不育材料与可育材料的鉴定工作已成为目前亟待解决的难题，是洋葱产业化的源头工作。

近年来，分子生物学的发展为植物遗传标记提供了一种基于DNA变异的新技术手段，即分子标记技术。与其他标记方法相比，分子标记具有无比的优越性。它直接以DNA形式出现，在植物体的各个组织、各发育时期均可检测到，不受季节、环境的限制，不存在表达与否的问题；数量多，遍及整个基因组；多态性高，利用大量引物、探针可完成覆盖基因组的分析；中性标记，即不影响目标性状的表达，与不良性状无必然的连锁；共显性标记，能够鉴别出纯合的基因型与杂合的基因型，提供完整的遗传信息。RFLP标记、AFLP标记操作较为繁琐，而RAPD标记准确性和稳定性较差，均不适合于大规模的田间材料的鉴定工作；SCAR标记操作简便、准确性高、稳定性高克服了上述标记的缺点，成为了首选的分子标记方法。所谓的SCAR标记就是指将特异性片断两端测序，合成特异性引物，进行特异性片断扩增，其优点是准确性高、稳定性好。