[发明专利]一种尿促卵泡素的提取方法无效
申请号: | 200910015316.7 | 申请日: | 2009-05-09 |
公开(公告)号: | CN101555278A | 公开(公告)日: | 2009-10-14 |
发明(设计)人: | 殷小崴;许京堂;李海勇;何西涛;谷彩霞;李雪洁;王丽丽;张建勇;张立军;尤加宇;王斌;刘家彩;张海玉 | 申请(专利权)人: | 山东众山生物科技有限公司 |
主分类号: | C07K14/59 | 分类号: | C07K14/59;C07K1/36 |
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地址: | 276807山东省日照市岚*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 卵泡 提取 方法 | ||
技术领域
本发明涉及一种化学药物提取工艺,尤其是一种尿促卵泡素的提取方法。
背景技术
尿促卵泡素是由垂体前叶嗜碱性细胞合成、分泌的一类糖蛋白,由a、β两个亚基组成,α有85个氨基酸,β有115个氨基酸,特异性由β亚基组成,分子量约33000。尿促卵泡素的主要生理功能是促进卵泡的各种细胞生长、发育,以利卵母细胞的成熟。尿促卵泡素的作用包括:促进卵泡周围间质细胞分化为内、外两层泡膜细胞并合成促黄体生成素受体;促进卵泡颗粒细胞增生和颗粒细胞内的芳香化酶系统活化,使雄激素转化为雌激素;促进卵泡液分泌,使卵泡细胞逐渐增大。尿促卵泡素主要针对排卵障碍引起的不孕症,并广泛应用于人工授精、试管婴儿等辅助生育技术中。目前,尿促卵泡素的提取工艺比较复杂,生产周期长,产品收率不高,导致生产成本大大增加,无法满足市场需求。
发明内容
本发明的技术任务是针对现有技术的不足而提供一种尿促卵泡素的提取方法,利用本方法可显著地简化工艺、缩短生产时间、降低耗能、提高产品活性、收率、纯度。
本发明的具体提取方法,包括以下流程:将原料通过调节PH值至碱性,经过滤、超滤得浓缩液,再加入有机溶剂得沉淀物,干燥沉淀物即得尿促卵泡素。
上述原料为尿液。
其具体步骤为:
(1)调节PH值:用20%氢氧化钠调节原料的pH值至8.0~9.0;
(2)过滤、超滤浓缩:调节pH值后,向尿液中加入1%硅藻土进行过滤,将滤液打入超滤罐,通过10000分子量超滤膜超滤浓缩;
(3)有机溶剂沉淀:在搅拌下,先向浓缩液中加入10%乙酸铵,以及有机溶剂使有机溶剂浓度达到70-75%,过滤,收集清液,再向溶液中加入有机溶剂,使有机溶剂浓度达到80-85%,搅拌均匀后静置沉淀3-5小时,过滤收集沉淀物,有机溶剂洗涤2-3遍,脱水干燥后即可得到尿促卵泡素粗品。
上述有机溶剂为乙醇或丙酮。
本发明的优点是工艺技术简化,产品收率高,生产成本低。
具体实施方式
下面通过实施例对本发明做详细描述。
(1)通过采集绝经期妇女尿液1000L,经检验合格后的尿液投入罐内,用用20%氢氧化钠调节尿液的pH值至8.0~9.0;
(2)调节pH值完毕后,向尿液中加入10kg硅藻土,搅拌均匀,用板框进行过滤;
(3)将过滤好的溶液打入超滤罐,通过分子孔径为10000的超滤膜超滤,浓缩液10L打入沉淀罐,在搅拌下,向浓缩液中加入10%乙酸铵;
(4)在搅拌下,向浓缩液中加入乙醇使浓度达到70%,过滤,收集清液,然后再向清液中加入乙醇,使浓度达到80%,搅拌均匀后静置沉淀5小时。沉淀物用95%乙醇洗涤3遍,脱水干燥后即可得到该产品10.8克。
使用雌性幼大白鼠卵巢增重法进行生物测定,上述方法生产的尿促卵泡素粗品生物活性为6.0国际单位/毫克。
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