[发明专利]一种碳源依赖型瑞氏木霉遗传转化系统及其应用无效
| 申请号： | 200910015398.5 | 申请日： | 2009-06-04 |
| 公开（公告）号： | CN101565714A | 公开（公告）日： | 2009-10-28 |
| 发明（设计）人： | 汪天虹;张光涛;李娴;张纪伟 | 申请（专利权）人： | 山东大学 |
| 主分类号： | C12N15/80 | 分类号： | C12N15/80;C12P21/02;C12R1/885 |
| 代理公司： | 济南金迪知识产权代理有限公司 | 代理人： | 王绪银 |
| 地址： | 250100山东*** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 碳源 依赖 型瑞氏木霉 遗传 转化 系统 及其 应用 | ||
【权利要求书】：
1.一种碳源依赖型瑞氏木霉遗传转化系统，包括出发菌株和携带有目的基因以及缺陷型回补基因的载体；其特征在于：所述出发菌株为缺失己糖激酶基因1的营养缺陷型菌株H.jecorina TU-6H，该菌株不能以甘露醇或山梨醇为唯一碳源生长；所述目的基因为人源激素基因或瑞氏木霉蛋白分泌相关基因；所述缺陷型回补基因为己糖激酶基因1即hxk1；
其中，上述缺失己糖激酶基因1的营养缺陷型菌株H.jecorina TU-6H是以含有己糖激酶基因1基因1.4kb的5’侧翼序列和1.8kb的3’侧翼序列及标记基因5’-乳清酸核苷酸脱羧酶基因pyr4的质粒pΔhxk1作为敲除载体，采用原生质体转化的方法转化出发菌株H.jecorina TU-6，即ATCC MYA-256菌株，而构建得到的同源敲除己糖激酶基因1的菌株。
2.如权利要求1所述碳源依赖型瑞氏木霉遗传转化系统，其特征在于：所述人源激素基因是促红细胞生成素基因epo。
3.如权利要求1所述碳源依赖型瑞氏木霉遗传转化系统，其特征在于：所述瑞氏木霉蛋白分泌相关基因是热休克蛋白基因hsp70。
4.权利要求1所述碳源依赖型瑞氏木霉遗传转化系统在制备促红细胞生成素中的应用。
5.权利要求1所述碳源依赖型瑞氏木霉遗传转化系统在改造瑞氏木霉蛋白分泌途径中的应用。
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