[发明专利]一种获得长牡蛎杂种优势的制种方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种长牡蛎(Crassostrea gigas)种内杂交新品系的制作方法，特别涉及一种利用长牡蛎不同地理群体进行杂交获得长牡蛎杂种优势的制种方法，属于海洋生物新品种选育技术领域。

背景技术

长牡蛎亦称太平洋牡蛎，属于软体动物门(Mollusca)，瓣鳃纲(Lamellibranchia)，翼形亚纲(Pterimorphia)，珍珠贝目(Pterioida)，牡蛎科(Ostridea)。长牡蛎由于其营养价值较高，是重要的经济种，又由于牡蛎室内工厂化人工育苗生产技术的突破，为牡蛎养殖业的发展提供了充足的苗种来源。因此，在我国长牡蛎养殖区域遍布南北沿海。随着养殖规模的扩大，产量大幅度提高，长牡蛎的品质却在下降，种质也出现退化，表现出养殖的长牡蛎出肉率低下、形态不规则、肉质不好的缺点，因此，市场价格偏低，达不到牡蛎活体出口标准，严重影响牡蛎养殖业的发展。因此，如何获得生长快速、经济性状较好、抗病能力强、抗逆性好的优良品种成为实现长牡蛎养殖业增产、增效的关键。

杂交是水产生物育种的重要途径之一，已经在水产生物的品种改良和生产中发挥了重大的作用。栉孔扇贝的中国种群与日本种群间的正反交杂种一代无论是在早期生长发育，还是在中期生长发育都表现出明显的杂种优势；栉孔扇贝中国种群与俄罗斯种群杂交后代也表现出杂种优势。此外，杂交选育在鲍、马氏珠母贝以及其它海水养殖动物中也有研究，并取得了一定的成果。但目前长牡蛎还没有种群间杂交获得杂种优势的报道。

发明内容

本发明的目的是提供一种利用中国长牡蛎和韩国长牡蛎杂交获得长牡蛎杂种优势的制种方法，从而培育出成活率高、生长快速的杂交优势显著的长牡蛎。

一种获得长牡蛎杂种优势的制种方法，其特征在于选择中国和韩国的长牡蛎作为亲贝，进行暂养，同步促熟中国和韩国长牡蛎，然后利用人工授精将中国和韩国长牡蛎的精、卵进行杂交，最后进行杂交牡蛎的孵化、苗种培育和养成。

本发明利用生殖隔离的两个长牡蛎地理群体进行杂交，培育出抗病力强、成活率高、生长速度快的长牡蛎杂交苗种，该长牡蛎杂交苗种生产性状明显优于中国本地自交的对照群体，且方法简单，具有很好的产业化应用前景。

具体实施方式

下面结合实施例对本发明作进一步详细说明。

1.选择亲贝进行暂养

本发明所用的中国长牡蛎群体于2008年2月取自山东乳山，韩国长牡蛎群体于2008年1月取自韩国釜山。选择个体大，壳型规则，健康的个体，入池后在5-10℃海水中室内暂养。

2.同步促熟

将上述室内暂养的长牡蛎每天倒池1-2次，投喂硅藻、扁藻和淀粉饵料，日升温0.5-1℃，升至17-18℃后，保持水温不变。

3.利用人工授精进行杂交

将上述促熟后的长牡蛎解剖，取少许性腺组织，放置在滴有海水的载玻片上，呈颗粒状散开的是卵子，呈烟雾状弥漫开的是精子。将分别获得的卵子和精子以群体交配的方式进行杂交。

实验组：

对照组：

(注：“♀”表示雌性，表示雄性)

4.孵化

杂交后受精卵密度为30-50个/ml，水温控制在22-24℃，充气，搅拌，进行孵化。

5.孵化后的苗种培育与养成

胚胎发育到D形幼虫时，用浮选法将D形幼虫移入育苗池培育，幼虫密度为5-10个/ml，水温控制在22-24℃，充气。开口饵料为金藻，之后混合投喂扁藻、角毛藻，日投喂3-4次，投喂量以胃部饱满为标准。日换水1-2次，换水量50％。当30-40％的幼虫出现眼点时，投放附着基。投放附着基后，日换水1次，换水量70-80％，投喂金藻、扁藻和角毛藻，投喂量根据稚贝的摄食情况和水中残饵情况确定。在室内连续培养，确认自然海区无野生牡蛎浮游幼虫后，转至海上笼式浮筏悬挂养殖。各实验组的放养密度和水层深度均保持一致。养成期间，每隔2个月将笼取回，剔除笼上附着生物，观测生长情况，并逐渐疏散密度。

本发明在具体实施过程中统计了各实验组的受精率和孵化率(表1)，以及育苗和养成期各实验组的生长和存活青况。和的两杂交组的受精率介于和两个对照组之间，的受精率和孵化率高于其他三个交配组。

在幼虫和稚贝期，韩国长牡蛎♀×中国长牡蛎♂和中国长牡蛎♀×韩国长牡蛎♂两杂交组的壳高、壳长自第10天表现出明显的生长优势。两杂交组壳高的杂种优势率：第180天为9.76和5.85，第300天为8.42和3.52(表2)。