[发明专利]一种分离生姜精油中烯类有效成分的方法

说明书

一、技术领域

本发明涉及一种天然活性产物的分离方法，尤其是一种柱层析分离生姜精油中多种烯类有 效成分的方法。

二、技术背景

生姜精油是从姜科植物姜Zingiber officinale Rosc.的新鲜根茎中采用水蒸气蒸馏、压榨、 超临界二氧化碳萃取等方法得到的挥发性组分，为棕色油状液体，具有生姜的浓郁香味和辛辣 味，早期主要用于食品及饮料的加香调味剂，同时也是一种重要的香精原料，现在其药用价值 逐步受到重视。

生姜精油中主要含有烯类和酚类两大类成分，烯类包括姜烯、α-姜黄烯、β-没药烯、β-水 芹烯、β-倍半水芹烯等成分，酚类也包括多种成分。各成分均具有一定的生物活性应用价值， 例如姜烯是生姜精油的主要成分之一，具有抗病毒、抗溃疡、抗生育等多种活性；α-姜黄烯和 β-没药烯均有良好的抗生育活性；β-水芹烯是一种香料和香料中间体，也是天然的杀虫剂；姜 酚具有抗氧化、抗肿瘤、防治心血管疾病等多种用途。鉴于生姜精油中各种化学成分分别具有 不同的药用或其他作用，将它们进行精细分离是本领域研究的趋势，所获分离物具有广阔的应 用前景。

目前，国内外关于生姜精油的研究，主要集中在生姜精油组成分析和姜酚的分离两方面， 而对生姜精油中烯类成分分离的研究较少。中国专利CN1251367A公开了一种超临界二氧化碳 萃取分离生姜中有效成分的方法，从生姜中分离得到生姜油树脂和生姜精油两种成分复杂的混 合物(生姜精油中已鉴定的组分有约30多种，姜油树脂中已鉴定的组分约40多种)。中国专 利CN1762956A公开了一种超临界柱层析制备总姜酚的方法，但未提及生姜精油中的烯类成 分。美国的Jocelyn G.Millar发表了“从生姜精油中快速分离姜烯”(Jocelyn G.Millar.Rapid and Simple Isolation of Zingiberene from Ginger Essential Oil[J].J.Nat.Prod.1998，61，1025-1026)的 论文，文中叙述：首先将生姜精油进行Kugelrohr蒸馏(微量旋转蒸馏)，取主要含有倍半萜烯 的馏分，加入亲双烯体物质，使其与含有同环共轭双烯的姜烯发生Diels-Alder加合反应，加 合物浓缩后采用闪式色谱法精制，之后在KOH的乙醇溶液中还原姜烯，再利用硅胶G柱去除 痕量的苯胺，最终可得到纯度达99％的姜烯(气质分析)。该法步骤多，成本高，在反应及后 续处理过程中加入了较多的化学试剂。此方法有较强的选择性，只针对姜烯设计工艺路线，是 适用于实验室制备姜烯标准样品的方法。但至今姜烯标准样品未见商品化。总结现有文献，尚 未见有关生姜精油或姜油树脂中多种烯类物质分离的报道，也未见有产业化前景的任何一种烯 类成分分离工艺的报道。因而，有必要对生姜精油中烯类有效组分的分离做进一步研究。

层析法是利用混合物中各组分物理化学性质的差异(如吸附力、分子形状及大小、分子亲 和力、分配系数等)，使各组分在两相(一相为固定的，称为固定相；另一相流过固定相，称为 流动相)中的分布程度不同，从而使各组分以不同的速度移动而达到分离的目的。硅胶柱层析 法是根据不同物质由于吸附、溶解性质的不同，在硅胶固定相和洗脱剂流动相中的分配系数不 同，从而达到分离纯化的目的，具有分离速度快、效率高、分离效果明显等特点，可应用于生 物活性物质的分离。

三、发明内容

本发明的目的是提供一种通过一次分离生姜精油获得β-水芹烯、姜烯、α-姜黄烯等烯类有 效成分的工艺。

本发明的基本构思是采用柱层析，固定相为层析硅胶，流动相为混合洗脱剂，生姜精油置 于层析柱顶端，洗脱剂洗脱，依次收集洗脱液后进行浓缩，得到含有不同有效成分的浓缩产物。 方法步骤为：

1、取生姜精油，加无水乙醇溶解，再加入粒度48-75μm的层析硅胶，搅拌均匀后去除溶 剂，得到吸附有生姜精油的硅胶，生姜精油、无水乙醇与层析硅胶的质量比为1∶2-5∶1-5；

2、另取层析硅胶装入层析柱中，层析硅胶与生姜精油的质量比为20-50∶1，再将吸附有 生姜精油的硅胶置于层析柱顶端，采用乙醚与正己烷或石油醚的混合洗脱剂进行洗脱，混合洗 脱剂的体积比为2-5∶98-95，依次收集含有β-水芹烯、姜烯、α-姜黄烯和β-没药烯的三段洗脱 液；

3、将三段洗脱液分别浓缩，获得浓缩产物。