[发明专利]一种杜仲叶中提取绿原酸的方法及其应用

说明书

技术领域

本发明公开了一种杜仲叶中提取绿原酸的方法，本发明还公开了一种绿 原酸在鱼病防治物中的应用。

背景技术

杜仲(Eucommia ulmoides)在我国是一种具有2000多年历史的中药材， 其功效为补肝肾，强筋骨，安胎等；同时杜仲对治疗高血压症有特效。绿原 酸为杜仲叶主要有效成分之一，具有显著的生理活性。绿原酸为咖啡酰奎尼 酸衍生物，具有利胆、抗菌、抗病毒、降压、升高白细胞及兴奋中枢神经系 统等多种药理作用，是保健食品、药品、化妆品等工业的重要原料。绿原酸 多从植物中提取，以往国内外提取绿原酸主要从生咖啡豆和金银花中获得。

杜仲叶为杜仲科落叶乔木杜仲的叶子，其绿原酸含量为1％～5.5％，一 直以来人们都是以杜仲皮入药，而叶子往往被废弃。现代医学研究证实了杜 仲叶与皮的化学成分基本一致，具有同等功效，可以以叶代皮。我国杜仲资 源储备丰富，广泛分布于长江、黄河中上游地区，干叶年产量相当大，完全 能够满足鱼饲料中添加的要求。以杜仲叶为原料提取绿原酸具有广阔的开发 前景。

在马希汉等所撰写的“从杜仲叶中提取绿原酸纯品的研究”(参见《西北 林学院学报》1996，11(2)：58-60)，采用氯仿脱脂、化学萃取、无机盐析， 此工艺方法未能有效的去除杜仲叶中的杂质(如蛋白质、胶质、纤维素)，使 绿原酸很难溶出，且只适用于实验室小剂量制备。在王洪武等所撰写的“杜 仲叶中绿原酸类物质的提取研究”(参见《江西师范大学学报》)(自然科学版) 1977，21(4)：339-341)中，采用的是溶剂提取、碱性Pb(OAc)和KOAc 沉淀，再溶解萃取重结晶制得，但铅会在绿原酸产品中存有残留，含铅提取 液会对环境造成不良影响，因此，该方法不适宜工业化大规模生产。在戚向 阳等撰写的《杜仲叶绿原酸的提取、分离和鉴定》(参见《植物资源与环境》 1998，7(1)：61-62)中，采用水浸提、101树脂分离、有机溶剂萃取纯化， 其绿原酸的含量仅为24.33％。以上工艺技术未对绿原酸提取、纯化过程中的 各种影响因素没有给以综合考虑和解决，且要求达到99％以上的含量，生产 成本大和有的并未达到工业化生产的规模。专利98112603.0“一种鱼杜仲饲 料的生产方法”是将杜仲叶直接粉碎后添加饲料中，且添加量在5-8％，添加 量过大，不仅影响了饲料的营养配比，而且还在一定程度上影响了饲料产品 外观和适口性(吕武兴“杜仲饲料添加剂应用研究现状与展望”(参见《饲料 世界》2004年4期)。专利200410045040.4“杜仲饲料添加剂”主要是以杜 仲叶的提取物为全部添加，而2000年王纪亭等在“杜仲叶对肉鸡生产性能影 响的研究”一文中表明在肉仔鸡日粮中添加杜仲提取物，对肉仔鸡全期生长 并无显著影响。这可能是由于杜仲有效成分中的黄酮类化合物，对许多酶的 活性有抑制作用(参见《国外医药》1998彭芳“黄酮类化合物的生物活性”) 能抑制动物的生长，降低其饲料的利用率。本发明主要以杜仲叶中绿原酸活 性成分为添加物。

发明内容

本发明的目的之一是克服现有技术中存在的不足，提供一种工艺操作简 便、成本低、无有害溶剂、得率高、适用于工业化生产的杜仲叶中提取绿原 酸的方法。

本发明的另一目的是提供一种绿原酸在鱼病防治物中的应用。

按照本发明提供的技术方案，所述杜仲叶中提取绿原酸的方法包括如下 步骤：

1.1.1粉碎：将新鲜或干燥的杜仲叶粉碎，过80目筛，得到杜仲叶粉末；

1.1.2酶处理：在杜仲叶粉末中添加活力为500～1000U/g的植物纤维素酶 并放入密闭容器中，植物纤维素酶的添加量为杜仲叶粉末重量的0.4％～0.6％ 倍，再在密闭容器中加入pH4～5的去离子水并搅拌均匀，去离子水的加入量 为杜仲叶粉末重量的8～12倍，控制混合物的温度为35～50℃，恒温浸泡20 小时以上；

1.1.3超声波处理：将酶处理后的混合物在常温、超声波频率为 20～100KHz条件下波处理20～40min；

1.1.4过滤：将超声波处理后的混合物用高速离心机过滤或者用板框压滤 机在0.1～0.4Mpa的压力范围内压滤出滤液；

1.1.5提取：过滤后的滤渣用滤渣重量8～12倍的、50～80℃的去离子水强 制回流0.5～1小时，重复提取1～3次得到提取液；