[发明专利]一种高产腺苷蛋氨酸的菌种及其筛选方法

说明书

技术领域

本发明涉及微生物技术领域，具体涉及一种高产腺苷蛋氨酸的菌种及其筛选方法，还公开了使用该菌种制备腺苷蛋氨酸的方法。 

背景技术

S-腺苷蛋氨酸又称活性甲硫氨酸，英文名为S-adenosylmethionine，缩略语为SAM、SAMe或AdoMet。其化学结构式如下图： 

它是一种广泛存在于生物体内、具有重要生理活性的中间代谢物，在细胞代谢中的重要性仅次于三磷酸腺苷(ATP)。作为一种重要的生理活性物质，它参与机体代谢的甲基化，并与包括基因调控、荷尔蒙活性、神经传导发育和解毒在内的众多关键的身体机能密切相关。研究表明SAM对多种疾病有明显疗效，如其对酒精性肝病、抑郁症，以及阿尔茨海默症等均具良好疗效(NEWMANPE 2000)。SAM是生物体内的一种天然分子。药用SAM由意大利基诺(Knoll)药厂首先用于临床。1999年，美国FDA批准SAM作为保健品上市，迅速在美国成为最畅销的营养品之一。自1973年以来，对该药的临床特点进行了一系列研究，发现其对慢性肝脏疾病和抑郁症有较好的疗效。SAM治疗抑郁症的机理尚不清楚，但是可以肯定的是S-腺苷蛋氨酸是一种与已知其它抗抑郁药化学结构和作用机理均不相同的新型抗抑郁药。其疗效肯定，不良反应轻，耐受性良好，而且起效可能较快。这些都让我们看到了它在医药方面的巨大潜力。 

目前SAM的合成主要有化学合成法、酶促合成法和微生物发酵法，其中化学合成法是采用S-腺苷同型半胱氨酸和甲基供体合成。但是此法有产率低、反应物S-腺苷同型半胱氨酸价格昂贵、反应产物为(+)SAM的混消旋物、少量非活性(+)SAM难以分离等明显缺点，因而在实际生产中很少应用；酶促合成法是利用SAM合成酶催化底物L-甲硫氨酸和ATP生成(-) 型SAM。该法虽具有反应产物纯度高、分离提纯容易、反应周期短等优点，但是，SAM合成酶在动植物和微生物体内含量少、酶活性不高，且分离困难，因此一般只将其用于合成同位素标记的SAM；微生物发酵法是采用在培养基中添加L-蛋氨酸，利用微生物发酵，可以获得大量的SAM，再从中提取精制SAM。现国内外主要利用腺苷转移活性高的酵母菌发酵法制取SAM，但未见具体的SAM生产规模表达量的报道，主要是因为采用诱变后随机筛选的方法，效率低，偶然性非常大。我国浙江海正药业等已具备发酵法生产的能力，却因为表达或转化量还较低、分离纯化成本较高，大规模工业化与开拓市场还在探索中。因此高效率低成本获取SAM技术的研究具有重要的意义。 

发明内容

本发明的目的是针对以上现有技术的缺陷，提供一种高产腺苷蛋氨酸的菌种及其筛选方法，提高腺苷蛋氨酸的产量，解决在腺苷蛋氨酸生产过程菌种筛选效率低下的问题。 

本发明筛选出的一株腺苷蛋氨酸高产菌株，命名为SAM0238，该菌株菌落为乳白色，有光泽，平坦，边缘整齐，如图1所示。其分类名为Saccharomyces cerevisiae，保藏号为CGMCCNo.2842，保藏时间：2008年12月，保藏单位：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心。 

本发明的菌株SAM0238的筛选方法包括以下步骤： 

a.制备酿酒酵母菌悬液：取活化后的酿酒酵母经摇瓶培养至对数生长期后，加入磷酸盐缓冲液制成酿酒酵母菌悬液；