[发明专利]单胺氧化酶诊断试剂(盒)及单胺氧化酶活性浓度测定方法无效
申请号: | 200910028206.4 | 申请日: | 2009-02-04 |
公开(公告)号: | CN101793694A | 公开(公告)日: | 2010-08-04 |
发明(设计)人: | 王尔中 | 申请(专利权)人: | 苏州艾杰生物科技有限公司 |
主分类号: | G01N21/33 | 分类号: | G01N21/33;G01N35/00;C12Q1/26;C12Q1/32 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 215021 江苏省苏州*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 单胺氧化酶 诊断 试剂 活性 浓度 测定 方法 | ||
1.一种利用酶比色法及酶联法技术的单胺氧化酶活性浓度测定方法,其方法如下:
胺类化合物+水+氧 单胺氧化酶 相应醛类产物+氨+过氧化氢
过氧化氢+二氧化碳+乙酰辅酶A 酮酸氧化酶 丙酮酸+
辅酶A+氧
丙酮酸+甲胺+还原型辅酶 N-甲基丙氨酸脱氢酶
N-甲基丙氨酸+水+辅酶
将最终反应物置于紫外/可见光分析仪或半、全自动生化分析仪下,检测主波长340nm吸光度下降的速度,测算出单胺氧化酶的活性浓度大小结果。
2.一种单胺氧化酶诊断/测定试剂(盒),主要成分包括:
缓冲液 20——500mmol/L
稳定剂 1——4000mmol/L
还原型辅酶 0.1——0.35mmol/L
丙酮酸氧化酶 1000——80000U/L
N-甲基丙氨酸脱氢酶 1000——80000U/L
胺类化合物 1——50mmol/L
碳酸氢钠(二氧化碳) 1——50mmol/L
乙酰辅酶A 1——50mmol/L
甲胺 1——50mmol/L
本发明测定单胺氧化酶活性的诊断试剂盒的成分当中,所述“胺类化合物”优选以下物质之一:苄胺、对苯甲胺-β-偶氮萘酚、丁基胺、戊基胺、β-苯乙基胺、酪胺、5-羟色胺或者这七种物质的衍生物,但选择范围不受这些列举所限制。碳酸氢钠(二氧化碳)可以用其它碳酸氢盐取代。
试剂成分的浓度不一定只限于上述范围;在此范围内效果较好,在此范围外,试剂仍会反应作用。
其特征在于:试剂(盒)可以是干粉状态,在使用前加水溶解后使用;也可以配制成液体试剂,直接使用。
3.根据权利要求2所述单胺氧化酶诊断/测定试剂(盒),其特征在于:
由缓冲液、稳定剂、还原型辅酶、丙酮酸氧化酶、N-甲基丙氨酸脱氢酶、胺类化合物、碳酸氢钠(二氧化碳)、乙酰辅酶A、甲胺组成单剂试剂。
4.根据权利要求2所述单胺氧化酶诊断/测定试剂(盒),其特征在于:
由缓冲液、稳定剂、还原型辅酶、丙酮酸氧化酶、N-甲基丙氨酸脱氢酶、胺类化合物、碳酸氢钠(二氧化碳)、乙酰辅酶A、甲胺组成双剂试剂;试剂1,由缓冲液、稳定剂、还原型辅酶、胺类化合物、碳酸氢钠(二氧化碳)、乙酰辅酶A、甲胺组成;试剂2,由缓冲液、稳定剂、丙酮酸氧化酶、N-甲基丙氨酸脱氢酶组成。还原型辅酶、丙酮酸氧化酶、N-甲基丙氨酸脱氢酶、胺类化合物、碳酸氢钠(二氧化碳)、乙酰辅酶A、甲胺在试剂1或试剂2中的位置可以不限。
5.根据权利要求2所述单胺氧化酶诊断/测定试剂(盒),其特征在于:
由缓冲液、稳定剂、还原型辅酶、丙酮酸氧化酶、N-甲基丙氨酸脱氢酶、胺类化合物、碳酸氢钠(二氧化碳)、乙酰辅酶A、甲胺组成多剂试剂;试剂1,由缓冲液、稳定剂、还原型辅酶、胺类化合物、碳酸氢钠(二氧化碳)、乙酰辅酶A、甲胺组成;试剂2,由缓冲液、稳定剂、N-甲基丙氨酸脱氢酶组成;试剂3,由缓冲液、稳定剂、丙酮酸氧化酶组成。还原型辅酶、丙酮酸氧化酶、N-甲基丙氨酸脱氢酶、胺类化合物、碳酸氢钠(二氧化碳)、乙酰辅酶A、甲胺在试剂1、试剂2或试剂3中的位置可以不限。
6.根据权利要求2所述单胺氧化酶诊断/测定试剂(盒),其特征在于:还包括稳定剂1-4000mmol/L或0.1%-100%体积比。所述稳定剂为:硫酸铵(Ammonia Sulfate)、甘油(Glycerol)、丙二醇(Propylene Glycol)、乙二醇(Ethylene glycol)及防腐剂中的至少一种。
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