[发明专利]灭活疫苗的一步乳化方法

说明书

技术领域

本发明涉及疫苗乳化剂，尤其涉及灭活疫苗的一步乳化方法。

背景技术

目前灭活疫苗生产工艺一般需要三步：第一步是将注射白油与油溶性乳化剂混合均匀，第二步是抗原液与水溶性乳化剂混合均匀，第三步是将上述两步均匀溶液放入一起进行乳化，制备出均匀稳定的油包水灭活疫苗。该方法工艺繁琐，流程较长，能耗高，生产效率低。其主要原因是油溶性乳化剂不溶于水，水溶性乳化剂不溶于油，因此乳化工艺必须分三步完成。

目前我国生产灭活疫苗的油溶性乳化剂一般为司本-80(又称span-80或司盘-80)，水溶性乳化剂一般为吐温-80(Tween-80)。

发明内容

本发明的目的在于提供一种生产工艺步骤简洁、生产成本低且其乳化剂具有增强免疫活性作用的一种灭活疫苗一步乳化方法，它由下述技术方案予以实现：

包括下述步骤：

1)合成乳化剂取一定量甘露醇在氮气保护下，于190-200℃的条件下脱水0.4～0.6小时，然后分别缓慢加入1.5～2.5倍和1/220～1/180倍于所述甘露醇重量的油酸和氢氧化钠，恒温脂化2.5～3.5小时，所得产品为甘露醇油酸脂，其结构式为：

2)灭活疫苗配置按66：7～70：7的体积份取注射白油和上述乳化剂，用乳化泵以9000～11000转/分对上述比例的注射白油和乳化剂混合物进行搅拌，边搅拌边加入一定体积份的灭活抗原液，灭活抗原液完全加入后继续以9000～11000转/分的转速搅拌50～70秒，然后停机25～35秒，再以14000～16000转/分搅拌110～130秒，配成乳化的灭活疫苗。

所述灭活疫苗在动物接种方面的应用。

本发明的有益效果是：工艺简洁，流程较断，能耗低，生产效率高，其配制的灭活疫苗性能稳定，免疫活性强，同时其中的乳化剂具有增强免疫活性的作用。

附图说明

图1是本发明方法和三步法制取的疫苗其免疫效果比较图。

具体实施方式

下述实施例采用108.17EID50/0.1ml；HA＝210的尿囊液作为灭活抗原液。

实施例1

第一步合成乳化剂

取40g甘露醇在氮气保护下，于195℃的条件下脱水0.50小时，然后分别缓慢加入相当于40g甘露醇重量的2.0倍和1/200倍的80g油酸和0.20g氢氧化钠NaOH，恒温脂化3小时，得到甘露醇油酸脂的乳化剂，该甘露醇油酸脂的结构式为：

第二步配置灭活疫苗

按68：7的体积份数取注射白油和上述乳化剂，用乳化泵以10000转/分对上述比例的注射白油和乳化剂进行搅拌混合，边搅拌边加入上述灭活抗原液25体积份，灭活抗原液完全加入后继续以1000转/分的转速搅拌60秒，然后停机30秒，再以15000转搅拌120秒，配置成乳化的禽流感(Re-5株)灭活疫苗。

实施例2

第一步合成乳化剂

同样取40g甘露醇在氮气保护下，于190℃的条件下脱水0.40小时，然后分别缓慢加入相当于40g甘露醇重量的1.5倍和1/220倍的60g油酸和0.18g氢氧化钠NaOH，恒温脂化2.5小时，得到甘露醇油酸脂的乳化剂，该甘露醇油酸脂的结构式同上述实施例。

第二步配置灭活疫苗

本实施例还是采用108.17EID50/0.1ml；HA＝210的尿囊液作为灭活抗原液。

按70：7的体积份数取注射白油和上述乳化剂，用乳化泵以9000转/分对上述比例的注射白油和乳化剂进行搅拌混合，边搅拌边加入灭活抗原液24体积份，灭活抗原液完全加入后继续以9000转/分的转速搅拌50秒，然后停机25秒，再以14000转搅拌110秒，配置成乳化的禽流感(Re-5株)灭活疫苗。

实施例3

第一步合成乳化剂

还是取40g甘露醇在氮气保护下，于200℃的条件下脱水0.60小时，然后分别缓慢加入相当于40g甘露醇重量的2.5倍和1/180倍的100g油酸和0.22g氢氧化钠NaOH，恒温脂化3.5小时，得到甘露醇油酸脂的乳化剂，该甘露醇油酸脂的结构式与实施例1相同。

第二步配置灭活疫苗

本实施例采用A(该抗原菌种是否有名称，如有请给名称)牛白蛋白抗原液