[发明专利]异柠檬酸测定试剂(盒)及异柠檬酸浓度测定方法

权利要求书

1.一种酶倍增法、酶比色法及酶联法的异柠檬酸的浓度测定方法，其方法如下：

异柠檬酸+辅酶  异柠檬酸脱氢酶  二氧化碳+酮戊二酸+还原型辅酶

酮戊二酸+丙氨酸    谷丙转氨酶    丙酮酸+谷氨酸

丙酮酸+辅酶A+辅酶  丙酮酸脱氢酶  二氧化碳+乙酰辅酶A+

                                          还原型辅酶

将最终反应物置于紫外/可见光分析仪或半、全自动生化分析仪下，检测主波长340nm吸光度上升的程度，测算出异柠檬酸的浓度大小测定结果。

2.一种异柠檬酸测定试剂(盒)，主要成分包括：

缓冲液                    20——500mmol/L

稳定剂                    1——4000mmol/L

辅酶                      1——6mmol/L

异柠檬酸脱氢酶            1000——80000U/L

谷丙转氨酶                1000——80000U/L

丙酮酸脱氢酶              1000——80000U/L

丙氨酸                    1——50mmol/L

辅酶A                     1——50mmol/L

试剂成分的浓度不一定只限于上述范围；在此范围内效果较好，在此范围外，试剂仍会反应作用。

其特征在于：试剂(盒)可以是干粉状态，在使用前加水溶解后使用；也可以配制成液体试剂，直接使用。

3.根据权利要求2所述异柠檬酸测定试剂(盒)，其特征在于：

由缓冲液、稳定剂、辅酶、异柠檬酸脱氢酶、谷丙转氨酶、丙酮酸脱氢酶、丙氨酸、辅酶A组成单剂试剂。

4.根据权利要求2所述异柠檬酸测定试剂(盒)，其特征在于：

由缓冲液、稳定剂、辅酶、异柠檬酸脱氢酶、谷丙转氨酶、丙酮酸脱氢酶、丙氨酸、辅酶A组成双剂试剂；试剂1，由缓冲液、稳定剂、辅酶、丙氨酸、辅酶A组成；试剂2，由缓冲液、稳定剂、异柠檬酸脱氢酶、谷丙转氨酶、丙酮酸脱氢酶组成。辅酶、异柠檬酸脱氢酶、谷丙转氨酶、丙酮酸脱氢酶、丙氨酸、辅酶A在试剂1或试剂2中的位置可以不限。

5.根据权利要求2所述异柠檬酸测定试剂(盒)，其特征在于：

由缓冲液、稳定剂、辅酶、异柠檬酸脱氢酶、谷丙转氨酶、丙酮酸脱氢酶、丙氨酸、辅酶A组成多剂试剂；试剂1，由缓冲液、稳定剂、辅酶、丙氨酸、辅酶A组成；试剂2，由缓冲液、稳定剂、谷丙转氨酶、丙酮酸脱氢酶组成；试剂3，由缓冲液、稳定剂、异柠檬酸脱氢酶组成。辅酶、异柠檬酸脱氢酶、谷丙转氨酶、丙酮酸脱氢酶、丙氨酸、辅酶A在试剂1、试剂2或试剂3中的位置可以不限。

6.根据权利要求2所述异柠檬酸测定试剂(盒)，其特征在于：还包括稳定剂1-4000mmol/L或0.1％-100％体积比。所述稳定剂为：硫酸铵(AmmoniaSulfate)、甘油(Glycerol)、丙二醇(Propylene Glycol)、乙二醇(Ethylene glycol)及防腐剂中的至少一种。