[发明专利]快速的化学发光免疫检测系统及分析方法

权利要求书

1.一种快速的化学发光免疫检测系统及分析方法，其特征在于该系统由溶液传输系统、温育系统、磁分离系统、信号采集系统构成。其中溶液传输系统由小试管(1-4)、多位阀(5)、蠕动泵(6)和硅橡胶管(7)所组成。小试管(1)装有待测样品、酶标记抗体和表面固定了抗体的磁珠混合物，小试管(2)装有洗涤缓冲液，小试管(3)装有化学发光底物液，小试管(4)装有盐酸溶液。四个小试管分别连接到多位阀(5)的四个入口，而多位阀出口连接到蠕动泵(6)的硅橡胶管(7)，由蠕动泵(6)结合多位阀(5)实现不同溶液的传输。温育系统由玻璃螺旋管(8)和真空红外加热管(9)组成，温育混合物溶液在蠕动泵的推动下在玻璃螺旋管(8)中来回流动，以加速免疫试剂的混合，同时由真空红外加热管(9)将螺旋管中温育混合物溶液快速加热到37℃，并在温育过程中保持此温度。磁分离系统由玻璃盘管(10)和永磁铁(11)组成，永磁铁(11)放在玻璃盘管(10)下，可捕获温育过后的磁珠及其表面形成的复合物。信号采集系统由玻璃盘管(12)和光电倍增管(13)组成。玻璃盘管(12)置于光电倍增管(13)的光窗前，当待检测的溶液区带流过玻璃盘管时，其化学发光信号可被光电倍增管(13)采集。

2.根据权利要求1所述的检测系统，其特征在于所述的多位阀(5)可通过转动实现不同流路的切换。多位阀(5)的转动由计算机控制。

3.根据权利要求1所述的检测系统，其特征在于所述的蠕动泵(6)的转速、流体流速和流动方向通过计算机进行自动调节。

4.根据权利要求1所述的检测系统，其特征在于所述的温育系统可使温育混合物溶液在玻璃螺旋管(8)中来回流动，以加速免疫试剂的混合。同时由真空红外加热管(9)将螺旋管中温育混合物溶液快速加热到37℃，并在温育过程中保持此温度。这样就通过混合和加热的方法实现了免疫反应的双重加速。

5.根据权利要求1所述的检测系统，其特征在于所述的永磁铁(11)用于收集温育反应后在玻璃盘管(10)内悬浮液中的磁珠。玻璃盘管(10)可有效地防止磁珠的聚集并且便于磁珠的重新混合。

6.根据权利要求1所述的检测系统，玻璃盘管(12)可用于增强待检测溶液区带的混合，从而增强化学发光，增加检测器所能接受的光信号。

7.一种快速的化学发光免疫检测系统及分析方法，其分析步骤如下：

①将样品、固定了捕获抗体的磁珠与辣根过氧化物酶标记的抗体加入到溶液传输系统的小试管(1)中，用蠕动泵(6)提供动力将小试管(1)中温育混合物溶液经由多位阀(5)和硅橡胶管(7)通入螺旋玻璃管(8)中，并在螺旋玻璃管(8)中来回流动，同时用真空红外石英管将温育混合物溶液快速加热到37℃，并在温育过程中保持此温度；

②将温育混合物溶液通入玻璃盘管(10)，用永磁铁(11)收集温育反应后的悬浮液中的磁珠，并转动多位阀(5)，通入小试管(2)中的洗涤缓冲液对磁珠进行洗涤；

③转动多位阀(5)，通入小试管(3)中的化学发光底物液与磁珠混合，由磁珠表面免疫复合物上标记的辣根过氧化物酶引发化学发光反应，将磁珠与化学发光底物液的混合溶液通入玻璃盘管(12)，由光电倍增管收集化学发光信号

④转动多位阀(5)，通入小试管(4)中的盐酸溶液消除残留信号，并对系统通道进行洗涤，转动多位阀(5)，通入小试管(2)中的洗涤缓冲液对系统通道进行洗涤，为下一次检测做准备。

⑤最后收集磁珠，用再生缓冲液再生，可重复使用。

8.根据权利要求8所述的分析方法，其特征在于步骤②和④中的洗涤缓冲液为0.01M磷酸盐缓冲液，pH 7.4，含0.05％吐温-20；步骤④中的盐酸溶液为0.1M盐酸溶液。

9.根据权利要求8所述的分析方法，其特征在于步骤③中的底物液为鲁米诺、双氧水和对碘苯酚溶液。

10.根据权利要求8所述的分析方法，其特征在于步骤⑤中使用的再生缓冲液为0.1M甘氨酸/盐酸缓冲液，pH 2.0。