[发明专利]通过高效液相色谱法检测盐酸艾司洛尔光学异构体的方法

说明书

技术领域

本发明涉及通过高效液相色谱法检测盐酸艾司洛尔(Esmolol Hydrochloride)光学异构体的方法，更具体的说是检测盐酸艾司洛尔光学异构体生产过程中或者是盐酸艾司洛尔光学异构体产品中R-盐酸艾司洛尔、S-盐酸艾司洛尔的方法。

背景技术

盐酸艾司洛尔有一个手性中心，具有2个光学异构体，其结构式分别为：

(S)-Esmolol Hydrochloride           (R)-Esmolol Hydrochloride

其化学名分别为4-[(2S)-2-羟基-3-(异丙氨基)丙氧基]苯丙酸甲酯盐酸盐，4-[(2R)-2-羟基-3-(异丙氨基)丙氧基]苯丙酸甲酯盐酸盐，分子式：C₁₆H₂₅NO₄·HCl，分子量：331.15。盐酸艾司洛尔是一种超短效的选择性β₁-受体阻滞剂，不具有内在拟交感活性和膜稳定作用。其作用机制主要作用于心脏β₁受体，具有减缓静息和运动心率，降低血压，降低心肌耗氧量的作用。很多异构体通过高效液相色谱法分离的方法是已知的，但流动相、溶剂、柱温、色谱柱等因素对于检测结果有很大影响或不适用于目标检测物。

发明内容

本发明的目的是提供通过高效液相色谱法检测在盐酸艾司洛尔光学异构体手性合成中所得样品的光学异构体纯度，以控制成品的质量。

本发明采用纤维素酯类为固定相的手性柱进行检测，纤维素酯类结构中的空穴和通道与光学异构体选择性的形成了异构体包合物，从而达到分离。

流动相对实验结果中R-盐酸艾司洛尔、S-盐酸艾司洛尔分离度及峰形均有很大影响，经发明人实验摸索，确定以正己烷-异丙醇-二乙胺(70～98∶2～30∶0.02～0.5，优选为75～90∶10～25∶0.05～0.2，更优选为80∶20∶0.1)为流动相效果很好。其中加入二乙胺可以改善峰形。

溶剂的选择与R-盐酸艾司洛尔、S-盐酸艾司洛尔分离度有关。经实验确定采用正丙醇、异丙醇、乙醇、正丁醇、甲醇作为溶解用溶剂，优选以异丙醇为溶剂。

本发明提供的通过高效液相色谱法检测R-盐酸艾司洛尔、S-盐酸艾司洛尔的方法的具体条件如下：

1.色谱条件：色谱柱采用纤维素酯类为固定相的手性柱；流动相为正己烷-异丙醇-二乙胺(70～98∶2～30∶0.02～0.5，优选为75～90∶10～25∶0.05～0.2，更优选为80∶20∶0.1)；检测波长为200nm～240nm(优选为210nm～230nm，更优选为约220nm)；柱温为20～45℃(优选为30～40℃，更优选为35℃)；流动相流速为0.5～2.0mL/min(优选为0.8～1.2mL/min，更优选为约1.0mL/min)。

2.样品溶液的配置：采用有机溶剂(优选选自正丙醇、异丙醇、乙醇、正丁醇、甲醇，更优选为异丙醇)，将样品配制为含盐酸艾司洛尔光学异构体0.1～2.0mg/mL的溶液(优选0.5～2.0mg/mL，更优选为1.0mg/mL)的溶液。

3.测定：将溶液注入高效液相色谱仪，记录色谱图，并进行分析。

采用此色谱条件测定R-盐酸艾司洛尔、S-盐酸艾司洛尔分离度均超过1.5，符合中国药典要求。此色谱条件同时可用于盐酸艾司洛尔光学异构体的定量。

附图说明

图1：按照实施例1的条件分离R-盐酸艾司洛尔、S-盐酸艾司洛尔的高效液相色谱图。

图2：按照实施例2的条件分离R-盐酸艾司洛尔、S-盐酸艾司洛尔的高效液相色谱图。

具体实施方式

实施例1.

仪器：SHIMADZU LC-10AT高效液相色谱仪，SPD-10Avp紫外检测器，OV-100柱温箱；

色谱柱：CHIRAL CEL OD-H色谱柱(0.46×25cm，5μm)；

流动相：正己烷-异丙醇-二乙胺(80∶20∶0.1)

柱温：35℃

流速：1.0mL/min

检测波长：220nm。

定位溶液1的配制：精密称取R-盐酸艾司洛尔适量，用异丙醇溶解并稀释成1.0mg/mL；

定位溶液2的配制：精密称取S-盐酸艾司洛尔适量，用异丙醇溶解并稀释成1.0mg/mL；

混合样品溶液的配制：精密称取R-盐酸艾司洛尔、S-盐酸艾司洛尔适量，用异丙醇溶解并稀释成含R-盐酸艾司洛尔、S-盐酸艾司洛尔各1.0mg/mL；