[发明专利]油菜雄性不育细胞质NAU8A的育种方法

说明书

技术领域

本发明公开了一种甘蓝型油菜细胞质及其特征线粒体DNA序列，属于遗传工程 领域和植物育种领域。具体地讲，涉及十字花科植物的杂种优势利用，为十字花科 植物杂交种选育提供新型不育细胞质细胞质。

技术背景

细胞质雄性不育可以应用于杂交种生产，效益巨大，已经为人们普遍认可。细 胞质雄性不育系用于配置杂交种，可提高油菜菜籽产量15％以上，也可可显著提高 十字花科蔬菜的产量。

目前，在油菜乃至十字花科植物中，主要应用细胞质雄性不育主要是：polima CMS、陕2A、Ogu CMS(参见：刘平武等，甘蓝型油菜pol CMS育性恢复基因的 分子标记中国油料作物学报，2007，29(1)：14-19.)。

polima CMS是傅廷栋教授于1972年在甘蓝型油菜品种波里马中发现19株天然 细胞质雄性不育株，后将稳定下来的不育系称polima CMS(简称pol CMS)，其恢复 基因位于A组染色体上，为一对显性基因。Pol CMS不育性也受温度的影响，依其 保持系细胞核基因的不同，可分为高温不育、低温不育和稳定不育3种类型。通过 筛选，获得缺乏温度敏感基因的保持系，可育成不育性稳定的pol cms系。pol CMS 目前的应用面最广。

陕2A CMS是李殿荣(1980)于1976年在甘蓝型油菜品种间复交组合(574-3/(丰收 4号+7207混合授粉)]后代中发现的半不育株，后经连续回交转育得到稳定不育系陕 2A，其恢复基因为1对显性基因。陕2A与pol CMS具有共同的保持系和恢复系， 由其配制的三系杂种“秦油2号”是国际上第一个通过品种审定、并大面积用于生 产的甘蓝型三系杂交种。

Ogu CMS是由0gura(1968)在日本萝卜Raphanus sativas L.群体中发现天然雄性 不育，选育得到的系统。法国Bannerot等(1977)采用连续回交的方法将这种胞质分 别转育到甘蓝型油菜和甘蓝中，得到油菜萝卜质雄性不育系。ogu CMS不育性稳定， 所有甘蓝型油菜品种均是它的保持系，其恢复基因存在于欧洲的萝卜品种中。Ogu CMS生产的杂交油菜已经在英、法等国商品化生产。

目前，全世界已经报导的油菜不育细胞质有22种以上，但是应用较多的细胞质 主要是POL CMS。目前油菜CMS利用中还是存在一些问题，主要是：①油菜CMS 育性不稳定问题；②应用的CMS细胞质比较单一，让人不禁想起单一细胞质可能 造成的生产损失。因此，发掘新的油菜CMS系统仍然具有十分重要的意义。

我们在油菜原生质体融合后代中，发现不育株，通过杂交和回交，获得了NAU8A 型细胞质雄性不育系；鉴定分子线粒体DNA，证明NAU8A不育系是由线粒体重组 得到的新型不育系。

发明内容

技术问题  本发明的目的在于公开一种细胞质雄性不育NAU8A，该不育胞质是通 过原生质体融合后代选育而得到的。油菜及十字花科杂种优势利用中，存在不育细 胞质单一，育性不稳定等问题，本发明的细胞质雄性不育为解决细胞质单一问题提 供了新手段，可用于油菜及其十字花科杂种优势利用。

技术方案

上述NAU8A雄性不育细胞质，属于新型细胞质雄性不育类型，可用于甘蓝型油菜、 白菜等十字花科植物的杂种优势利用。通过杂交、回交等育种方式，育成NAU8A细 胞质的雄性不育系。

ATGCCTCAACTGGATAAATTCACTTATTTTTCACAATTCTTCTGGTTATGCCTTTTC

TTCTTTACTTTCTATATTTTCATATGCAATGATGGAGATGGAGTACTTGGGATCAGC

AGAATTCTAAAACTACGGAACCAACTGCTTTCACACTGGGGTAAGACCATCCAGA

GCAAGCTAAAGCTTGGTGGAAAAGATCGTACAAGTAAGTTCGGGGTCTTAGCGT

TCGCCACGCGCTTATTTCCTCATGTTCGTGGTCCCAAAAAATTTTATTTTTGGGATTA

AATGGGGTGCGGCTAGCTATATATCTAATATATGGTTTGAGTTGCTAGGAAATGAGA

TATTTCAGTTCGGCGTCGGACCAGATGGCGTCGCGCCCCCAGCTCTAGATCTCAA