[发明专利]买麻藤有效部位及其制备方法和在制备治疗痛风病药物中的应用

说明书

技术领域

本发明涉及一种中药买麻藤的有效部位、该有效部位的制备方法及它在制备治疗痛风病药物中的应用，属中药领域。

中药材买麻藤是指买麻藤科植物买麻藤Gnetum montanum Markgr或小叶买麻藤Gnetumparvifolium(Warb.)C.Y.Cheng的干燥藤茎，主要分布于两广、云南、海南、福建等地。买麻藤性温、味苦，具有祛风除湿、活血散瘀、消肿止痛等功效，民间用于治疗风湿性关节痛、腰肌劳损、刀枪伤、蛇咬伤、支气管哮喘和溃疡出血等症。买麻藤主要含有茋类、生物碱、挥发油、黄酮等类化合物，以茋类化合物如异丹叶大黄素、白藜芦醇及其低聚体和苷类含量最高。近年来的研究表明，异丹叶大黄素、白藜芦醇为代表的茋类化合物具有抗炎、抗氧化、抗肿瘤方面的生理活性，但未有其对于高尿酸导致痛风方面治疗的报道。现有技术中买麻藤活性成分的分离采用硅胶柱、聚酰胺柱色谱，得到了30余种茋类单体或衍生物，但这些方法主要针对单组分物质的分离，且所用的洗脱剂皆为毒性较大的有机溶剂，仅作为买麻藤中化学成分的研究手段，而不宜于工业化生产，因此买麻藤现有研究手段尚不能支持一种可供工业化制备较高纯度的买麻藤有效部位的纯化分离技术。

西医认为，痛风的发病是由长期嘌呤代谢紊乱和(或)尿酸排泄减少，导致体内尿酸含量过高而引起；中医认为，痛风多因饮食失宜，过食肥甘厚味，湿浊内蕴，日久化热所致，主要与湿浊，痰瘀，热毒有关。目前临床痛风病的治疗主要采用秋水仙碱减缓痛风急性发作，在缓解期用别嘌呤醇、溴苯马隆降低体内尿酸含量，防止痛风复发。但无论是秋水仙碱还是别嘌呤醇、溴苯马隆都有明显的毒副作用，限制了其临床应用。

发明内容

本发明的目的是提供一种可作为黄嘌呤氧化酶抑制剂的中药买麻藤的有效部位及该买麻藤有效部位的制备方法。本发明的另一目的是买麻藤有效部位用于制备治疗痛风病药物的应用。

本发明涉及的买麻藤有效部位，为棕色或棕褐色粉末，其中，总茋类化合物重量百分含量为50.0～70.0％，主要活性成分异丹叶大黄素、白藜芦醇含量分别为买麻藤有效部位总重量的10.0～20.0％、1.2～3.5％；本品不吸湿，易溶于含水乙醇，可溶于沸水或丙酮中，在冷水中溶解度较小，难溶于氯仿、石油醚等有机溶剂中，在紫外365nm处有较强的蓝色荧光。

买麻藤有效部位的制备方法，如下步骤：

(1)买麻藤原药材用15～25倍重量的水或体积浓度为40～70％的乙醇回流提取2～4次，每次0.5～2.0h，合并回流提取液，减压浓缩至1/3～1/4体积，4000r/min离心30min，上清液抽滤，用纯水稀释使总茋浓度为0.5～2.0mg/mL，得买麻藤母液；

(2)买麻藤母液上大孔吸附树脂柱，树脂用量为买麻藤原药材重量的0.5～2倍，树脂径高比1∶3～1∶9；母液的上柱流速为0.5～4倍树脂体积/小时(即每小时流过的母液是树脂体积的0.5～4倍量，下面以BV/h表示为流速单位，其中B代表“倍”，“V”表示树脂体积量)；

(3)用纯水洗柱，至洗脱液无色；然后用4～12BV的10～30％乙醇溶液预洗脱，再用4～12BV的40～70％乙醇溶液洗脱目标物，洗脱速度0.5～4BV/h；

本步骤中，水和10～30％乙醇溶液洗脱糖类、黏液汁等水溶性物质、鞣质以及一部分极性较大的苷类，40～70％乙醇溶液主要洗脱买麻藤总茋化合物，其中主要含异丹叶大黄素和白藜芦醇等活性物质。

(4)所得目标洗脱液减压浓缩至相对密度1.10～1.25，然后通过真空或喷雾干燥得买麻藤有效部位。

大孔吸附树脂的骨架是聚苯乙烯或聚丙烯酸，有多种型号供选择，如HPD-100型、HZ-816型、HPD-600型等。

步骤(2)中，母液可直接上大孔吸附树脂柱或与大孔吸树脂拌匀后上柱。

本发明通过体外实验发现，买麻藤有效部位对黄嘌呤氧化酶有明显的抑制作用，其半数抑制浓度IC₅₀为26.8μg/mL，较买麻藤水提物的IC₅₀低10倍左右，表明买麻藤水提物通过大孔树脂纯化后得到的买麻藤有效部位在体外抑制黄嘌呤氧化酶的活性显著增强。

体内实验研究结果表明，买麻藤有效部位能降低高尿酸模型小鼠血清中黄嘌呤氧化酶的活性(p＜0.05)，降低高尿酸模型小鼠血尿酸水平(p＜0.05)，买麻藤有效部位组(400mg/kg)与买麻藤醇提物组(1200mg/kg)作用强度基本相当，表明买麻藤醇提物经大孔树脂纯化后得到的买麻藤有效部位可以明显提高药效。