[发明专利]微生物发酵联产花生四烯酸和壳聚糖的方法

权利要求书

1.一种微生物发酵联产花生四烯酸和壳聚糖的方法，其特征在于生产步骤为：

a.按照培养基体积10％的接种量向培养基中接入霉菌，接种后的培养基置于温度为25～28℃、转速为120～140rpm的摇床中发酵培养，培养6～8天；所述霉菌为高山被孢霉（Mortierella alpina）CCTCC NO：M207067、深黄被孢霉（Mortierella isabellina）AS3.3410或拉曼被孢霉（Mortierella ramanniana）AS3.3413；

b.发酵结束后，对发酵液抽滤，将收集到的菌体在40～60℃烘干至恒重后研磨粉碎，用石油醚和乙醇抽提，再将石油醚和乙醇通过0.01MPa/45℃减压蒸馏除去即可得到花生四烯酸油脂；所述石油醚和乙醇的体积比例为3∶1，其中1体积的菌体用5～8体积的石油醚和乙醇进行抽提；

c.壳聚糖的提取：向步骤b所得的抽提后的滤渣中加入2～10wt％的氢氧化钠溶液，滤渣质量和氢氧化钠溶液体积的比例为1∶3～1∶6w/v，并煮沸2～4小时脱蛋白，水洗至中性，抽滤，向滤渣中加入双氧水，在沸水浴中放置0.5～1小时，水洗至中性，抽干，将滤渣加入0.5wt％高锰酸钾溶液中浸泡1～2.5小时脱色，脱色后将滤渣加入2～10wt％稀盐酸或醋酸溶液浸泡1～4小时，过滤，水洗至中性，用10～20wt％氢氧化钠溶液调滤渣pH至8～10，使壳聚糖絮状沉淀析出，过滤，水洗至中性，用乙醇洗涤，干燥得壳聚糖。

2.根据权利要求1所述的微生物发酵联产花生四烯酸和壳聚糖的方法，其特征在于所述培养基中碳源为葡萄糖、果糖、蔗糖或甘露糖中的一种或多种。

3.根据权利要求1所述的微生物发酵联产花生四烯酸和壳聚糖的方法，其特征在于所述培养基中氮源包括无机含氮化合物和有机含氮化合物，其中无机含氮化合物为乙酸铵、氯化铵、硝酸钾或硝酸钠中的一种或多种，有机含氮化合物为蛋白胨、酵母膏、玉米浆、麸皮水解液或牛肉膏中的一种或多种。

4.根据权利要求1所述的微生物发酵联产花生四烯酸和壳聚糖的方法，其特征在于所述培养基中无机盐为磷酸氢二钾、磷酸二氢钾、硫酸镁或氯化钙中的一种或多种。