[发明专利]可用于防治栗疫病的含有弱毒性病毒CHV1-CN280的菌株

说明书

一、技术领域

本发明为可用于防治栗疫病的含有弱毒性病毒CHV1-CN280的菌株 CHV1-CN280，简称菌株CN280，是一种存在于栗疫病菌菌株细胞质中的dsRNA病 毒及其应用于生物防治栗疫病的方法，属于植物保护领域，专用于板栗树栗疫病的防 治。

二、背景技术

板栗疫病由一种称作寄生隐丛赤壳(Cryphonectria parasitica)的真菌危害引起栗 树枝干病害，有的地区又称栗胴枯病、栗干枯病，是一种世界性栗树病害，苗木及大 树均可受害，主要危害主干及枝条，使栗实产量和质量明显下降，严重时造成全株枯 死。

栗树疫病于上世纪初自亚洲传播到欧美，引起欧美三十年代的栗树疫病大流行， 由于病害发生在树皮的韧皮部，药液很难渗透进去，美国使用了大量杀菌剂试图扑灭 栗疫病的蔓延都归于无效，最终毁灭了美国的数十亿株栗树，并使与其相关的化工、 制革、建筑木材工业从繁荣迅速走向衰败。我国是栗树疫病的起源地，分布广泛。我 国的板栗曾被认为是高度抗病的，但不少省、市，如辽宁、河北、河南、山东、安徽、 浙江、江西、广东、广西、湖南等省均有发生，有的地方还十分严重，甚至造成大片 板栗失收林毁，被列为国内外检疫对象。近年来随着各地种植栗树面积迅速扩大，栗 疫病已成为影响板栗产量的重要限制因素，因此，栗疫病流行规律的研究和有效防治 显得十分重要。

随着人们对化学农药残留、环境污染以及病菌抗药性发生发展的认识，绿色食品 和有机农业的大力推广，研制生物防治病虫害的生物农药已成为生产实际和农林产品 出口的迫切需求。

六十年代，意大利的栗树疫病由于发生了弱毒力菌系的扩展而得到有效控制，濒 临灭绝的意大利栗林逐渐得到恢复。法国科学家将意大利恢复生长的栗树上分离到的 栗疫病菌弱毒力菌株成功地应用于生产上进行生物防治，也有效地控制住了法国栗树 疫病的蔓延。经研究，发现栗疫病菌的这种弱毒性特征是由于菌株感染了一种裸露的 双链核糖核酸病毒(double-stranded RNA，dsRNA)引起的，这种dsRNA病毒存在于 病菌的细胞质中，可依赖真菌菌株间的菌丝融合进行传播，也可通过分生孢子传递给 下一代。现共鉴定出的四种栗疫菌弱毒性病毒(CHV1、CHV2、CHV3和CHV4)，属 新建立的弱毒性病毒科(Hypoviridae，单属科)。

CHV1病毒的基因组结构含有两个ORF：ORFA和ORFB。ORFA编码一个多聚 蛋白p69，它可以自我剪切成两个蛋白p29和p40，实施这一剪切功能的是位于p29 多肽链中的木瓜蛋白酶样半胱氨酸蛋白酶结构域。ORFB编码一个更大的多肽，其表 达中也涉及到一个自我剪切的过程，在此过程中产生一个48kD的蛋白质，p48，它具 有另外一个木瓜蛋白酶样半胱氨酸蛋白酶位点；另外ORFB还编码两个比较保守的蛋 白，RNA聚合酶和解链酶。

三、发明内容

技术问题本发明的目的是针对我国部分地区板栗栗疫病不能有效进行化学防 治的情况，筛选一种栗疫病菌弱毒性病毒CHV1-CN280毒株用于生物防治，含有该 病毒的弱毒力菌株能安全有效地将弱毒性病毒传播给毒力菌株，并由此控制和防治栗 树林中栗疫病的危害和蔓延，安全、无污染，有效期长。

其内容和实施方案如下：

可用于防治栗疫病的含有弱毒性病毒CHV1-CN280的菌株，其特征在于：该栗 疫病菌菌株CHV1-CN280含有CHV1-CN280病毒，分类上属于寄生隐丛壳 (Cryphonectria parasitica)，现保藏于中国微生物菌种保藏委员会(北京)，保藏日 期：2009年6月29日，保藏号：CGMCC No.3136。

所含有的弱毒性病毒CHV1-CN280，分类上属于：弱毒性病毒科(Hypoviridae)， 弱毒性病毒属(Hypovirus)，栗疫病菌弱毒性病毒(Cryphonectria hypovirus)1号种。

所述菌株和病毒均可在生物防治栗疫病方面的应用。其用于生物防治栗疫病的方 法为：利用含有CHV1-CN280弱毒性病毒的栗疫病菌菌株的菌丝或孢子接种栗树的 栗疫病病斑周围从而使病斑愈合，栗树恢复正常生长。

有益效果