[发明专利]鲍曼菌液活性粗浸膏戊唑醇复配杀菌剂及其应用

说明书

一、技术领域：

本发明属于一种生物代谢物-化学协同增效梨树轮纹病杀菌剂农药，涉及一种有效活性成分为鲍曼菌素和戊唑醇的复配杀菌剂。

背景技术：

梨轮纹病(Botryosphaeria berengeriana de.Not.f.sp.Piricola(Nose)Koganecawa et.Sokwwwa)亦称粗皮病、瘤皮病、水烂病等，是我国梨树的重要病害之一。近年来，随着主栽品种的更迭，质优但感病品种的栽培面积不断扩大，该病的发生与危害日趋严重，给梨生产造成了很大的损失，严重影响了梨果的质量和产量。我国每年因梨轮纹病危害造成梨果实减产约25％，严重时烂果率高达80％以上，而且该病不仅侵染田间生长的梨果实、叶片和枝干，还可引起采后果实腐烂，已成为田间和果实贮藏期的重要病害之一。当前梨树轮纹病仍以化学防治为主，但随着“农药公害”、“抗药性”等问题的日趋严重，以及生物防治技术的推广应用，人们也将生物防治深入扩展到病害防治的研究领域。

植物内生菌(Endophyte)是指在植物体内完成其生活史的部分或全部，生长于植物组织的细胞间，分布于叶鞘、种子、花、茎、叶片和根中，但又不引起任何病症的微生物。植物内生菌是一种多样性十分丰富的生物类群，分布广，种类多，具有极其丰富的生物多样性。植物内生菌包括内生细菌、内生放线菌和内生真菌。自20世纪70年代后期，内生菌在一些重要的经济林木，如云杉、红杉、紫杉、桉树、栎树等植物树皮、枝叶内相继被发现并得到了广泛的研究和应用。在多种灌木、草本植物以及栽培作物等植物中也相继发现了内生菌。如从棉花、番茄、甜菜、茄子、瓜类、马铃薯等农作物中分离到Pseudomonas，Serratia，Alcaligenes，Shigella，Citrobacter，Herbaspedicae，Clavibacter，Aumobacterium，Hydrogenophaga，Flavimonas等50多个属的内生细菌。其中从植物内生菌中分离得到的抗菌活性物质结构类型多样，主要有萜类、生物碱类、芳香类、肽类等化合物，具有较强的抑菌、杀菌活性，是临床抗菌药物和生物农药研究与开发的新资源。

鲍曼菌素(Acinetobacter baumannii)是南京大学从药用植物樟树内生细菌中分离出来的次生代谢物，该鲍曼菌株为LCH0606，它是一种植物生防菌，已经由CN1973631号专利文献公开(保藏号为：CGMCC No.1752)。采用该菌株离心后获得的鲍曼菌液次生代谢物对小麦赤霉病等病害具有较好的防治效果。针对鲍曼菌液产生的抗生素种类和活性物质量的分析，用13L鲍曼菌液经离心、大孔树脂吸附浓缩后得到0.5g/L鲍曼菌活性粗浸膏，再硅胶柱层析、葡聚糖凝胶Sephadex-LH20反复纯化鲍曼菌液中的抗菌活性物质，并经核磁、质谱等分析，得出鲍曼菌素的抗菌主要成分为脂肽类物质，其活性成分为Iturin A1，iturin A2、iturin A3和Iturin A6，三者含量比为1∶1∶1，活性化合物量为3mg/L。LCH0606，在PSA平板上37℃培养24h后的菌落呈现规则圆形、灰白色、表面低凹、不透明、干燥易挑取、无粘性、边缘光滑。对该菌显微染色观察结果为短杆状、无芽孢、无鞭毛，直径约1.0～1.5μm，革蓝氏染色呈阴性。在中性和碱性以及＜100℃条件下相对稳定，抗菌活性可保持80％以上；在酸性条件下鲍曼菌素的抗菌活性易受破坏。加入Ca²⁺可显著提高抗菌活性。易容于水。经处理后病原菌表现为孢子不萌发，菌丝短小，细胞破裂而内含物流出。故LCH0606是一株具有较大开发潜力的农用生防菌。