[发明专利]硫酸-苯酚法测定灵芝产品中灵芝多糖含量的方法

说明书

技术领域

本发明涉及灵芝多糖的测定方法，具体地，涉及用硫酸-苯酚法测定灵芝产品中灵芝多糖的含量。

背景技术

灵芝(Ganoderma lucidum(Leyss ex Fr.)Krast.)属于担子菌纲、多孔菌科、灵芝属高等真菌。中华传统医学认为，灵芝味甘、性温、无毒、可补心、肝、肺、脾、肾五胀之气，具滋补强壮、固本扶正之功效。现代医学研究也表明，灵芝的主要有效成份是灵芝多糖，具有广泛的药理活性，具排毒、抗放射，提高肝脏、骨髓合成DNA、RNA的能力，抗肿瘤、增强机体免疫等效果。

灵芝多糖广泛存在于灵芝孢子、菌丝体和子实体中，从子实体和菌丝体中提取灵芝多糖已有许多报道，如公开号为CN1786033A(发明名称：灵芝多糖的制备方法)公开了一种从灵芝子实体中提取灵芝多糖的方法，该法将灵芝子实体经过前处理、微滤、冷冻分离、膜分离、膜浓缩、减压浓缩、减压干燥，得到灵芝粗多糖产品为纯天然成份，高营养，疗效好，所采用工艺环保、高效、节能。公开号为CN1307314(发明名称：酶解制备灵芝多糖的方法)巧妙地利用菌丝体自身酶系统和外加的混合酶系统在适宜的条件下对灵芝真菌发酵液进行酶解，酶解后得到的灵芝粗多糖中灵芝多糖的含量可达35-60％，灵芝多糖分子量在6000-50000之间的活性灵芝多糖占70-90％。近年来，人们也研究了利用菌丝体发酵产灵芝多糖的方法，如申请号为200810199102.5(发明名称为：一种从发酵液中提取灵芝多糖的方法)揭露了如何利用菌丝体发酵产灵芝多糖及灵芝多糖的提取方法。

随着灵芝多糖提取方法的深入研究，市场上灵芝多糖产品的种类和数量也日益繁多，其产品质量良莠不齐，导致市场混乱。尤其是国家对灵芝多糖产品的质量并无相应的检测标准，借鉴“GB/T15672-1995食用菌总糖含量的测定方法”进行测定，测定的结果为总糖含量，其结果不能准确反应灵芝中含有的活性有效成份灵芝多糖的含量。<<食品功效成份检测方法>>(王光亚主编，北京：中国轻工业出版社，2002.1)揭示了测定保健品功效成份的数种方法，其中“分光光度法测定枸杞子多糖含量”对测定灵芝孢子、子实体和菌丝体中灵芝多糖的含量，具有借鉴意义，然而，却不适用于测定灵芝产品中的灵芝多糖含量。

发明内容

本发明的目的是针对上述测定方法的不足，提供一种硫酸-苯酚法测定灵芝产品中灵芝多糖的方法，具有可操作性强、测定结果准确、灵敏度高，重现性好，一般常规实验室即可进行测定等优点。

本发明是通过如下技术方案实现的：硫酸-苯酚法测定灵芝产品中灵芝多糖含量的方法，由以下具体步骤组成：

1)称取m克的待测样品；

2)除去干扰成份：将步骤1)所述待测样品，溶于80～85％的乙醇中，59～61℃加热回流30min，3000～4500r/min离心10min，收集残渣；

3)提取多糖：用蒸馏水溶解上述残渣，并于94～96℃水浴加热回流1.5～2h，冷却后定容至V₁毫升，得提取液，混匀，过滤，收集滤液，量取V₂毫升滤液，稀释数倍，定容至V₃毫升，得待测溶液；

4)硫酸-苯酚法测定灵芝多糖含量：取待测溶液V₄毫升，补充蒸馏水至V₅毫升，V₅为1～5毫升，加入60g/L苯酚溶液1.6毫升，混匀，加入浓硫酸7.5毫升，混匀，室温放置25～30min，以空白试剂溶液做对照，用分光光度计在485nm波长处，测定吸光光度值，根据标准曲线得出待测液中多糖质量ml毫克，而后根据测液中多糖的质量计算出待测样品中多糖的含量。

计算公式如下：

X=m1×V1×V3×V5m×V2×V4]]>