[发明专利]水稻干尖线虫的检测方法及诊断试剂盒

权利要求书

1.一种检测水稻干尖线虫（Aphelenchoides besseyi Christie）的方法，其包括：

从可疑植物材料或土样中分离出待检测线虫，提取DNA;

以步骤（a）中获得的DNA为模板，使用SEQ ID NO：1和SEQ ID NO:2的引物对，进行聚合酶链式反应，得到扩增产物；

检测步骤（b）中获得的扩增产物，根据检测结果判断水稻干尖线虫的存在。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，当所述可疑植物材料或土样中存在大量线虫时，采用酚氯仿提取法提取DNA。

3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，当所述可疑植物材料或土样只存在单条线虫时，步骤（a）中所述的提取包括以下步骤：

（1）将单条线虫加入含有WLB溶液的管中；

（2）于-70℃放置30~60 min；95℃放置15~20 min；55~65℃放置2min；

（3）再加入蛋白酶K，55~65℃处理30 min~2 h；95℃处理15~20min，以获得作为单条线虫DNA模板的产物。

4.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述植物材料为水稻植株或种子。

5. 如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述植物材料是草莓、玉米、甘薯、大豆、蔬菜、兰花、菊花或大丽花的植株。

6.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤（c）中所述检测步骤（b）中获得的扩增产物的方法为电泳检测。

7.一种用于诊断水稻干尖线虫病的试剂盒，其包含SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2的引物对。