[发明专利]一种低浓度挥发性混合有机废气生物净化菌种的培育方法

权利要求书

1.一种低浓度挥发性混合有机废气生物净化菌种的培育方法，包括以下步骤：

1)培育菌种一，该菌种一为取自印染污水处理厂的具有黄杆菌属及蜡状芽孢杆菌属的混合菌种的活性污泥经培养驯化后所得，为黄杆菌属及蜡状芽孢杆菌属的混合菌种；其具体步骤包括：

a)制备菌种一的液体培养基：取磷酸盐缓冲液5.0mL，MgSO₄溶液3.0mL，CaCl₂溶液1.0mL，FeCl₃溶液1.0mL，微量元素溶液1.0mL混合，加入蒸馏水稀释至1.0L，并将pH值调整至7.0-7.2，经高压蒸汽灭菌，无菌分装后，加入0.5g液体二甲苯和0.5柴油，作为唯一碳源和能源，密封保存；

其中，制备菌种一的液体培养基的各溶液的成分为：

磷酸盐缓冲液：K₂HPO₄·H₂O 22.0g/L，KH₂PO₄ 7.6g/L，Na₂HPO₄·12H₂O 31.8g/L，NH₄Cl4.0g/L；

MgSO₄溶液：MgSO₄22.0g/L；

CaCl₂溶液：CaCl₂36.0g/L；

FeCl₃溶液：FeCl₃0.15g/L；

微量元素溶液：MnSO₄·H₂O 37.0mg/L，ZnSO₄·H₂O 41.0mg/L，(NH₄)₆Mn₇O₂₄·4H₂O32.0mg/L；

b)驯化：将取自印染污水处理厂的具有黄杆菌属及蜡状芽孢杆菌属的混合菌种的活性污泥混合液充分曝气活化，接着用超声振荡器处理使污泥絮体分散均匀，取处理好的污泥混合液加入筛选驯化培养基中，采用摇床试验对微生物进行好氧振荡培养；

c)将筛选的菌株接种于活化富集培养基中，好氧振荡后，置于高速离心机中离心，然后用磷酸盐缓冲液清洗、离心，将离心所得的菌体制成菌种悬浮液，即得菌种一；所述活化富集培养基成分为：牛肉膏5.0g，蛋白胨10g，NaCl 5g，水1000mL，并将其高压灭菌；

2)菌种一与菌种二混合接种，并用自来水调配混合菌种的污泥浓度，该菌种二为自石化污水处理厂的二沉池中采集的具有包括黄杆菌属、蜡状芽孢杆菌属、木糖氧化无色杆菌和施氏假单胞菌的混合菌种的活性污泥，其为包括黄杆菌属、蜡状芽孢杆菌属、木糖氧化无色杆菌和施氏假单胞菌的混合菌种；

3)以废气中混合有机物为底物，投配入接种物培养基中，对接种物培养驯化；所述接种物培养基的成分为：水解淀粉0.0～1.0g/L，尿素0.5～1.0g/L，KH₂PO₄0.2～0.3g/L，Na₂HPO₄0.2～0.3g/L，MgSO₄·7H₂O 0.1～0.2g/L，CaCl₂0.02～0.03g/L，维生素B₁0.05～0.15g/L。

2.如权利要求1所述的低浓度挥发性混合有机废气生物净化菌种的培育方法，其特征在于：该菌种二与菌种一混合接种的体积比为20∶1。

3.如权利要求1所述的低浓度挥发性混合有机废气生物净化菌种的培育方法，其特征在于：对所述菌种一和菌种二的接种物驯化的接种物培养基的最佳成分为：水解淀粉1.0g/L，尿素1.0g/L，KH₂PO₄0.25g/L，Na₂HPO₄0.25g/L，MgSO₄·7H₂O 0.15g/L，CaCl₂0.025g/L，维生素B₁0.1g/L。