[发明专利]接瓣兰种苗的试管繁殖方法

说明书

技术领域

本发明涉及植物种苗的繁殖方法，具体地说，涉及接瓣兰种苗的试管繁殖方法

背景技术

接瓣兰(Zygopetalum)是近几年从国外引进的新潮兰花，属于兰科接瓣兰属，本属约有15种，原产于巴西、委内瑞拉、巴拉圭等中、南美洲热带和亚热带地区。由于其唇瓣的基部有一个环状隆起，看起来像车轭，故又名轭瓣兰。由于接瓣兰花多而美丽，色泽艳丽，花期长，加之栽培容易，在国外，已作为盆花或切花而广泛栽培。接瓣兰种子由于胚发育不完全，自然状态下极难萌发，种苗奇缺，目前还没有有关接瓣兰种苗繁殖方法的报道，因此，研究和开发能获得大量接瓣兰种苗的繁殖方法，满足生产和市场的需要，具有广阔的应用前景。

发明内容

本发明的目的是提供一种能在短期内获得大量种苗的高效率的接瓣兰种苗的试管繁殖方法。

本发明提出的接瓣兰种苗的试管繁殖方法，包括以下的步骤：

(1)材料：选取生长健壮的接瓣兰母株，于开花时进行人工授粉，将授粉后发育至基本成熟而未开裂时的果实做为外植体用于播种；

(2)无菌播种或/和原球茎的增殖并分化培养：

a、无菌播种：将所述外植体用70％-80％的酒精浸泡30-60秒后置于0.1％-0.2％的升汞溶液中消毒10-20分钟，再用无菌水漂洗4～5次后切开果实，将其粉末状胚接种到种子萌发培养基中培养，所述的种子萌发培养基为复合花宝培养基1，其组份为每升含有：花宝1号2克，花宝2号1克，肌醇80-120毫克，甘氨酸1.5-2.5毫克，盐酸硫胺素(VB1)0.05-0.2毫克，盐酸吡哆醇(VB6)0.4-0.8毫克，烟酸0.4-0.8毫克，萘乙酸0.2-1毫克，椰子汁100-200毫升，蔗糖15-30克，琼脂6-7克，活性碳0.5-2克，pH 5.4-5.6；

b、原球茎的增殖并分化培养：当需要生产更多的小苗时，可将原球茎培养在复合花宝培养基2上，获得大量的类原球茎，再将类原球茎在复合花宝培养基1上培养成小苗，所述的复合花宝培养基2每升含有花宝1号1克，花宝2号2克，肌醇80-120毫克，甘氨酸1.5-2.5毫克，盐酸硫胺素(VB1)0.05-0.2毫克，盐酸吡哆醇(VB6)0.4-0.8毫克，烟酸0.4-0.8毫克，6-苄基嘌呤0.5-2.0毫克，萘乙酸0.2-1毫克，椰子汁100-200毫升，蔗糖15-30克，琼脂6-7克，活性碳0.5-2克，pH 5.4-5.6；

(3)壮苗培养：将在上述无菌播种培养所得的小植株或/和通过原球茎增殖并分化而得的小苗接种到壮苗培养基上培养，所述的壮苗培养基为复合花宝培养基3，其组份为每升含有：花宝1号2-3克，肌醇80-120毫克，甘氨酸1.5-2.5毫克，盐酸硫胺素(VB1)0.05-0.2毫克，盐酸吡哆醇(VB6)0.4-0.8毫克，烟酸0.4-0.8毫克，香蕉匀浆50-100克，萘乙酸0.2-1毫克，蔗糖15-30克，琼脂6-7克，活性碳0.5-2克，pH 5.4-5.6；

(4)试管苗移栽：当植株约4-6厘米高时，将培养瓶转移到自然光下炼苗10-15天，然后将植株从培养瓶中取出，洗净根部的培养基，移入兰石∶蕨根∶泥炭土为1∶0.5～2∶0.5～2的混合基质中；

上述步骤(2)～(3)中培养条件为培养温度24-28℃，光照度1500～2000lx，光照12-16小时/天。

步骤(1)所述的果实成熟期为120-150天。

在上述的步骤(2)b中，为了获得更多的类原球茎，在将原球茎培养在复合花宝培养基2上获得的类原球茎后，再将这些类原球茎再培养在新配的相同的复合花宝培养基2上，这些类原球茎在复合花宝培养基2上将会有大量增殖，40-50天时，增殖倍数可达3-4倍，然后再将增殖得到的类原球茎在复合花宝培养基1上培养成小苗。

步骤(2)～(3)所述的花宝1号和花宝2号可以从市场上购得。

本发明具有种子的萌发率高、成苗快、种苗品质好、成本低廉等特点，能在短期内获得大量的试管苗，成苗的移栽成活率90％以上。能为接瓣兰的种苗生产提供一条有效的途径。

具体实施方式

以下实施例是对本发明的进一步说明，不是对本发明的限制。实施例中使用的花宝1号(HYPONeX 1)、花宝2号(HYPONeX 2)为美国生产台湾台和园艺企业股份有限股份有限公司分装产品。

实施例一

(1)材料：开花时选取生长健壮的玛氏接瓣兰(Zygopetalum mackayi)的母株进行人工授粉，授粉后果实90天时基本成熟而未开裂时做为外植体用于播种。