[发明专利]基于环介导等温扩增技术的甲型肝炎病毒基因快速诊断试剂盒及其检测方法有效
| 申请号： | 200910041358.8 | 申请日： | 2009-07-24 |
| 公开（公告）号： | CN101660005A | 公开（公告）日： | 2010-03-03 |
| 发明（设计）人： | 曹以诚;黄逸男;李志勇;杜正平;陈洵;谭惠媚;王志强 | 申请（专利权）人： | 广州华峰生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/70 | 分类号： | C12Q1/70;C12Q1/68;C12R1/93 |
| 代理公司： | 广州粤高专利商标代理有限公司 | 代理人： | 陈 卫 |
| 地址： | 510663广东省广州市经济技*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 基于 环介导 等温 扩增 技术 肝炎 病毒 基因 快速 诊断 试剂盒 及其 检测 方法 | ||
1.基于环介导等温扩增技术的甲型肝炎病毒基因快速诊断试剂盒，其特征在于由两对引物、Bst DNA聚合酶、逆转录酶、RNA酶抑制剂、稳定液、反应液、显色液和阳性对照液组成，以上八种液体分别置于容器中，
上述两对引物为：
外引物F3，其核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示；
外引物B3，其核苷酸序列如SEQ ID NO：2所示；
内引物FIP，其核苷酸序列如SEQ ID NO：3所示；
内引物BIP，其核苷酸序列如SEQ ID NO：4所示；
上述反应液含有1.6～2mmol/L dNTP、20～25mmol/L Tris-Cl、10～12.5mmol/L氯化钾、10～12.5mmol/L硫酸铵、8～10mmol/L硫酸镁、0.1～0.125％TritonX-100、0.8～1mol/L甜菜碱、内引物FIP/BIP各1.6～2mol/L和外引物F3/B3各0.2～0.25mol/L；
上述阳性对照为携带甲型肝炎病毒基因的质粒DNA。
2.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于所述显色液为SYBR Green I或EvaGreen。
3.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于所述反应液含有2mmol/LdNTP、25mmol/L Tris-Cl、12.5mmol/L氯化钾、12.5mmol/L硫酸铵、10mmol/L硫酸镁、0.125％TritonX-100、1mol/L甜菜碱、内引物FIP/BIP各2mol/L和外引物F3/B3各0.25mol/L。
4.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于所述稳定液为石蜡油。
5.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于所述逆转录酶为AMV逆转录酶。
6.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于所述显色液为SYBR Green I或EvaGreen。
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