[发明专利]改善水体和生物肠道菌落结构的菌剂及制备方法与应用

说明书

技术领域

本发明属于生物技术领域，特别涉及一种改善水体和生物肠道菌落结构的菌剂及制备方法与应用。

背景技术

目前，水产养殖业迅猛发展，集约化高密度养殖规模日益扩大，导致病原微生物种类增多和传播速度加快，养殖生物病害发生日益严重，从而造成水产养殖业的严重损失。

迄今，国内外在水产养殖动物的疾病防治中，仍然主要使用抗生素等制剂。然而，抗生素大量滥用，会导致一些副作用的产生，如药物残留、病原菌的抗药性、抑制有益菌群等。而生物防治的方法则具有强大的优越性，引起各方的关注。

蛭弧菌自1963年被发现以来，由于其具有寄生型特性和宿主菌范围广特点，倍受人们关注。在食品安全或防治水产养殖病害领域，利用蛭弧菌消除或者抑制致病菌的方法，与容易引起很多副作用的抗生素灭菌的方法相比，前者更具有优越性。

申请号为200610039346.8的国家专利申请“一种噬菌体蛭弧菌制剂的生产方法”公开了一种噬菌蛭弧菌制剂的制备方法，但该方法用于培养蛭弧的菌宿主菌制剂为有益菌，这会导致蛭弧菌对有益菌裂解能力提升和对真正有害菌裂解能力钝化的潜在结果，而且不能解决有害菌死亡后在养殖水体和养殖生物肠道留下空缺的生态灶(niche)的问题。申请号为200710031166.X的国家专利申请“高密度蛭弧菌游泳体的发酵培养技术”公开了一种高密度蛭弧菌游泳体的发酵培养技术，不涉及制剂配制的问题。专利号为ZL 02145249.0的国家发明专利“微生物养殖水体改良剂及制作方法”公开了能分解养殖水域底部积累残余饵料、排泄废物、动植物残体以及有害气体，净化水质，提高养殖物的成活率的微生物养殖水体改良剂及其制备方法。但是这种微生物养殖水体改良剂没有解决养殖水体和养殖生物肠道致病菌的问题。

发明内容

本发明的首要目的在于克服现有微生物制剂不能同时改善水产养殖环境和养殖生物肠道环境的不足之处，提供一种能同时改善水体和生物肠道菌落结构的菌剂。

本发明的另一目的在于提供所述菌剂的制备方法。

本发明的再一目的在于提供所述菌剂的应用。

本发明的目的通过下述技术方案实现：一种改善水体和生物肠道菌落结构的菌剂，包含蛭弧菌菌液和有益菌菌液；

所述有益菌菌液由光合细菌、乳酸链球菌(Streptococcus lactis)、保加利亚乳杆菌(Lactobacillus bulgaricus)和水产生物肠道有益菌；

所述水产生物肠道的有益菌为菌株H₂菌液或菌株3y621菌液中的一种或两种；

所述H₂为本实验室从养殖生物肠道分离得到的革兰氏阳性菌[参考文献：钟雄明，蔡俊鹏。大闸蟹肠道中产酶菌株及其胞外酶的研究。水利渔业，2007，27(1)：91-92]，为短杆菌，成单或成对，链状较少，无荚膜，无芽孢，极生单鞭毛；30℃恒温培养24h，营养琼脂平板表面菌落圆形，湿润，灰白色，略隆起；

所述菌株3y621为本实验室从罗非鱼肠道中分离出的蛋白酶高产的菌株[参考文献：陈惠源，蔡俊鹏。罗非鱼肠道蛋白酶高产菌株及其适应力研究。水利渔业，2005，25(4)：86-87]；其为革兰氏阳性菌，细胞呈直杆状，0.4～0.5μm×2.0～2.5μm，常单个或以成对排列，有芽孢；30℃恒温培养24h，营养琼脂平板表面菌落圆形，湿润，灰白色，略隆起；

所述光合细菌优选红假单胞菌(Rhodopseudomonas sp.)、沼泽红假单胞菌(Rhodopseudomonas palustris)或荚膜红细胞(Rhodobacter capsulatus)中的至少一种；

所述蛭弧菌菌液和有益菌菌液优选按体积比1∶2～1∶4混合，其中蛭弧菌菌液的浓度为10⁵～10¹⁰pfu/ml，有益菌菌液的浓度为10⁵～10¹⁰cfu/ml；

所述改善水体和生物肠道菌落结构的菌剂的制备方法，包括以下步骤：将蛭弧菌液和有益菌菌液混合，得到上述改善水体和生物肠道菌落结构的菌剂。

所述改善水体和生物肠道菌落结构的菌剂的制备方法，包括以下步骤：分别将蛭弧菌液和有益菌菌液的浓度调整为10⁵～10¹⁰pfu/ml和10⁵～10¹⁰cfu/ml；调整浓度后蛭弧菌液和有益菌菌液按体积比1∶2～1∶4混合，得到上述改善水体和生物肠道菌落结构的菌剂。