[发明专利]基于核酸外切酶Ⅲ末端保护分析检测小分子与结合蛋白相互作用的荧光生物传感技术无效
申请号: | 200910043130.2 | 申请日: | 2009-04-17 |
公开(公告)号: | CN101526466A | 公开(公告)日: | 2009-09-09 |
发明(设计)人: | 蒋健晖;吴战;楚霞;沈国励;俞汝勤 | 申请(专利权)人: | 湖南大学 |
主分类号: | G01N21/31 | 分类号: | G01N21/31;G01N21/76;G01N33/68;C12Q1/68;C12Q1/28 |
代理公司: | 长沙正奇专利事务所有限责任公司 | 代理人: | 马 强 |
地址: | 410082*** | 国省代码: | 湖南;43 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 基于 核酸外切酶 末端 保护 分析 检测 分子 结合 蛋白 相互作用 荧光 生物 传感 技术 | ||
1.一种基于核酸外切酶III末端保护分析检测小分子与结合蛋白相互作用的荧光生物传感方法,其特征是,该方法包括:
(1)末端有机小分子修饰的寡核苷酸DNA链与蛋白的相互作用及核酸外切酶III保护寡核苷酸DNA链,然后对保护的寡核苷酸DNA链进行分析;
对于小分子与其结合蛋白的相互作用的检测的步骤是:取所述有机小分子修饰双链结构DNA寡核苷酸链的储备液置于微量管中;然后加入包含有机小分子的结合蛋白的样品溶液;再加入核酸外切酶III反应;
对于有机小分子的检测,采用竞争反应检测的步骤是:取所述有机小分子修饰双链结构DNA寡核苷酸链的储备液置于微量管中;然后加入包含待测小分子的样品溶液,混合均匀后加入一定浓度的小分子的结合蛋白或单克隆抗体溶液;再加入核酸外切酶III反应;
(2)基于双链指示染料对双链结构寡核苷酸DNA链进行末端保护,对所保护的双链结构寡核苷酸DNA链的荧光定量检测;所述检测采用标准的双链荧光嵌入染料指示剂法进行。
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