[发明专利]一种有特异靶向并具抗血吸虫作用的虫体膜结合短肽ZL-4及其应用

说明书

技术领域

本发明属于生物药品或生物试剂领域，具体涉及一种有特异靶向性并具抗血吸虫作用的虫体膜结合短肽ZL-4及其应用。

背景技术

长期以来，对肿瘤和病原治疗的药物使用，一直存在一个共同的缺陷：药物在体内使用，分布广，代谢快，到达靶标部位浓度低，这不仅使药物的生物利用度很低，而且更重要的是用低剂量药物不能奏效，用高剂量药物则会导致对全身的毒性作用，因此，人们早就提出——实现药物靶向治疗思路，即研发对肿瘤或病原有特异结合的分子作为靶向分子，用该分子与药物偶联后在人体使用，预期不仅可显著提高药物的生物利用度，更重要的是使药物高浓度集中于靶标部位发挥其药效作用，减低了药物对机体全身的毒副反应。因此，前期靶向分子的获取是十分重要的。目前，用于治疗疾病的多肽生物分子很多，如治疗糖尿病的胰岛素、抗病原微生物的抗菌肽和抗肿瘤药物的靶向多肽等。前二者已实现合成制备并被广泛应用于临床，后者尚属起步阶段，主要利用商品化的噬菌体肽库来筛选获得。血吸虫病是世界70个国家有流行分布的主要热带病，在我国流行的日本血吸虫病属人畜共患虫种，防治难度大，因此，尽管经历50多年防治并取得很大成绩，但它仍然在广阔的湖洲地区流行传播。其原因：预防人畜感染血吸虫的疫苗尚未问世；抗虫药物(吡喹酮和青篙素类)不能解决重复感染问题，而且抗成虫的药物疗效在下降，抗早期童虫(感染后1-7d内)药物尚未发现。因此，继续探索抗虫新药和提高抗虫效果的方法是当前血防研究的重要课题之一。

目前，研究报道比较多的是采用噬菌体随机多肽库，以抗体作为探针，来筛选获得血吸虫抗原模拟表位用于血吸虫病疫苗或诊断试剂的研究[舒新华、易新元、曾宪芳等；日本血吸虫病患者血清对噬菌体随机7肽库的免疫筛选；细胞与分子免疫学杂志；2000.16(2)：109-112.Ouyang L，Yi X，Zeng X等.Partial p rotection induced by phage library-selected peptidesmimicking epitopes of Schistosoma japonicum[J].Chin Med J(Engl)，2003，116(1)：138-141.Arnon R，TarrabK-Hazdai R，StewardM，et al.A mimotope peptide based vaccineagainst Schistosoma mansoni：synthesis and characterization.Immunology，2000，101(4)：555-562.王欣之，傅志强，黄劭鹏，等.噬菌体展示日本血吸虫Sj14单抗的模拟抗原表位及其免疫保护性研究.生物工程学报，2006，22(1)：119-124.]，亦有在疫苗研究方面提出免疫靶向概念，但该靶向分子则为特异性的抗体或单链抗体[何卓，汪世平，周帅锋等.抗日本血吸虫生殖功能分子SIEA26～28kDa单链抗体与EGFP的融合表达及靶向性研究，中国人兽共患病学报2008，24(8)：704-709]。

近年也有学者发现有特异性破坏血吸虫RNA和DNA的垂头状核酶基因并证明具有抗血吸虫作用，但当它单独在体内使用时不能直接到达虫体。如能找到理想的特异靶向分子与之偶联，不仅可解决特异结合到虫体发挥效应，还有可能达到提高抗虫效果和减少毒副作用的目的。

研究具有特异性靶向性作用的分子包括：特异性抗体分子(双链或单链)、配体分子和模拟配体的多肽分子或与离子通道结合的多肽分子。前二者(抗体和配体)具有抗原性，在异种生物体内应用具有抗原性，产生免疫反应所表现的副作用，显然在体内使用不安全，而后者为多肽分子具有使用安全的特点。

发明内容

本发明目的：一是筛选获得既具抗虫作用(含影响虫体生长发育)又可靶向抗虫药物功能的多肽生物分子，以期实现提高抗虫效果、提高药物在体内的生物利用度和减少其所致毒副反应；二是筛选获得能与血吸虫虫体产生特异性结合的分子，不仅可用来研究抗虫药物-多肽靶向制剂，而且也可用作研究制备特异性基因核酶-多肽靶向系统，用于人、畜血吸虫病治疗。还有可能作为一种试剂或探针用于研究血吸虫膜的生理特性(如离子通道)，亦有可能将该分子与放射性元素偶联用来研究血吸虫在宿主体内生长发育与移行的生物学规律。