[发明专利]果胶酶的工业化生产方法

权利要求书

1.一种果胶酶的工业化生产方法，其特征是它包括菌种培养、摇瓶发酵、酶液制备等步骤，所述菌种即蜡样芽孢杆菌（Bacillus cereus）、实验室编号为MAPLE21，保藏号：CCTCC NO：M 209147，其生物学特性为：菌体呈杆状，染色均匀，G⁺、兼性需氧，形成芽胞，芽胞不突出菌体，菌体两端较平整，多数呈链状排列。

2.根据权利要求1所述的果胶酶的工业化生产方法，其特征是所述的菌种培养为CCTCC NO：M 209147菌种在如下配制的斜面上生长良好，斜面培养基配方为：1000mL蒸馏水中，加入牛肉膏5g-10g，酵母膏5g-10g ，蛋白胨10g-15g，葡萄糖5g-10g ，氯化钠5g-10g ,调pH值6.9－7.1，0.1MPa灭菌20分钟－30分钟，制成试管斜面，接种该菌种，33℃－35℃，培养18小时－24小时，备用。

3.根据权利要求1所述的果胶酶的工业化生产方法，其特征是所述的摇瓶发酵为CCTCC NO：M 209147菌种在规定的培养条件下可产生高活力的果胶酶，这种培养条件是：培养基配方为麦麸6﹪－8﹪、玉米粉0.5﹪－1﹪、氮含量40﹪的玉米浆1﹪－2﹪、氯化钠0.5﹪－0.8﹪、微晶纤维素1﹪－2﹪、水86.5﹪－91﹪，其中所述各组分之和为100﹪，灭菌前，调pH值为8.0-8.5，0.1MPa灭菌25分钟－35分钟，培养条件：33℃－35℃，转速260 r/min -280r/min，培养18小时-22小时。

4.根据权利要求1所述的果胶酶的工业化生产方法，其特征是所述的酶液制备为由茄瓶斜面到种子罐到发酵罐，二级发酵，其培养基配方为麦麸6﹪－8﹪、玉米粉0.5﹪－1﹪、氮含量40﹪的玉米浆1﹪－2﹪、氯化钠0.5﹪－0.8﹪、微晶纤维素1﹪－2﹪、水86.5﹪－91﹪，其中所述各组分之和为100﹪，灭菌前，调pH值为8.0-8.5，0.1MPa灭菌25分钟－35分钟，装罐总体积不超过70％；培养条件：温度33℃－38℃，搅拌转速180 r/min－220 r/min，通气量以v/v 计：1：0.25 －0.55 ，罐压0.06 MPa－0.08MPa，培养周期：种子罐为7小时-8小时，发酵罐为12小时-16小时。

5.根据权利要求4所述的果胶酶的工业化生产方法，其特征是种子罐的培养条件：温度36℃－38℃，搅拌转速220 r/min，通气量以v/v 计： 0小时－5小时，1 ：0.40－0.46 、5小时以后1：0.50－0.55 ；发酵罐的培养条件：温度0小时－4小时，36℃－38℃，4小时以后33℃－35℃，搅拌转速：0小时－4小时，180 r/min，4小时－6小时，200 r/min，6小时以后220 r/min，通气量以v/v 计：0小时－4小时，1：0.25 －0.27，4小时－6小时，1 ：0.33－0.36，6小时以后1：0.5－0.55 。

6.根据权利要求4所述的果胶酶的工业化生产方法，其特征是在酶液制备后，制备标准果胶酶液，将发酵醪液经过板框过滤、硅藻土除菌，经防腐处理得到在15℃、密封存放三个月条件下，酶活力保持率为95%以上的标准果胶酶液。