[发明专利]一种用于铀污染检测的差异表达蛋白标准及运用无效
| 申请号： | 200910044390.1 | 申请日： | 2009-09-22 |
| 公开（公告）号： | CN101661017A | 公开（公告）日： | 2010-03-03 |
| 发明（设计）人： | 高利臣;肖璐;冯涛 | 申请（专利权）人： | 湖南科技大学 |
| 主分类号： | G01N27/62 | 分类号： | G01N27/62 |
| 代理公司： | 张家界市慧诚商标专利事务所 | 代理人： | 高红旺 |
| 地址： | 416400*** | 国省代码： | 湖南;43 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 用于 污染 检测 差异 表达 蛋白 标准 运用 | ||
1.一种用于铀污染检测的美洲商陆铀诱导下差异表达的标准蛋白斑点质谱图的获取方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)选取铀尾矿区的美洲商陆和非污染对照区域美洲商陆的根部作为材料，在-196℃液氮冷藏铀尾矿区的美洲商陆和非污染对照区域美洲商陆的根部组织；
(2)采用饱和酚-醋酸铵/甲醇沉淀法制备全蛋白；
(3)采用2D电泳方法展示全蛋白；
(4)通过对2种2D电泳图谱比对分析；
(5)筛选差异表达蛋白斑点：对差异表达蛋白斑点进行胶内酶解、抽提酶解肽段、质谱分析，最后得到5个美洲商陆铀诱导下差异表达的标准蛋白斑点质谱图。
2.权利要求1所述的用于铀污染检测的美洲商陆铀诱导下差异表达的标准蛋白斑点质谱图在铀污染检测中的运用。
3.根据权利要求2所述的用于铀污染检测的美洲商陆铀诱导下差异表达的标准蛋白斑点质谱图在铀污染检测中的运用，其特征在于，包括以下步骤：
(1)选取待检测环境中的美洲商陆和非污染对照区域美洲商陆的根部组织作为材料，在-196℃液氮冷藏待检测环境中的美洲商陆和非污染对照区域美洲商陆的根部组织；
(2)采用饱和酚-醋酸铵/甲醇沉淀法制备全蛋白；
(3)采用2D电泳方法展示全蛋白；
(4)通过对2种2D电泳图谱比对分析；
(5)筛选差异表达蛋白斑点：对差异表达蛋白斑点进行胶内酶解，Trypsin，20个小时、抽提酶解肽段、质谱分析，最后得到待检测环境中美洲商陆的差异表达的蛋白斑点质谱图，然后与5个美洲商陆铀诱导下差异表达的标准蛋白斑点质谱图进行相似性比对，从而准确鉴定环境是否遭到铀污染。
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