[发明专利]低分子肝素在制药中的应用

说明书

技术领域

本发明涉及低分子肝素的用途，尤其涉及低分子肝素在制药领域中的应用

背景技术

类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis，RA)是一种以关节滑膜炎症为特征的全身性慢性自身免疫性疾病，RA的发病机制至今仍不是很清楚，Trenthem首次发现50％的RA患者血清中存在有抗II型胶原(Collagentype II，CII)的自身抗体，并根据这些发现于1977年首次建立了实验性关节炎动物模型，CII大量存在于关节软骨中，同时也存在于视网膜和玻璃体中，CII是一种与免疫系统隔绝的蛋白质，但在某些病理条件下可作为一种自身抗原呈现出来，20世纪80年代至90年代初期，国外大量重复实验并在临床表现、病理组织学、针对胶原的体液和细胞的免疫反应，以及与主要组织相容性复合物(MHC)的关系等方面进行了广泛深入的研究。

随着人们对RA和CIA的深入研究，发现二者存在许多类似之处：如滑膜增生、血管翳形成及随之出现的软骨及骨破坏，侵犯肢体远端关节。近年来大量研究证实激活的T淋巴细胞在CIA的病理变化中同样发挥重要作用，认为T淋巴细胞的活化及其产生的细胞因子是引起CIA免疫损伤的主要诱导因素。CIA动物的外周血中一般都可以检出高浓度自身抗体，尤其是抗CII抗体。抗CII抗体在疾病早期即可出现，并随时间的延长逐渐下降，同时可以预测疾病的转归，这些特征均与人类RA相似。因此成为目前世界上公认的人类风湿性关节炎较为理想的动物模型之一，特别是在与治疗机制及免疫反应有关的研究中，CIA模型的优点将为研究者提供极大帮助。

在RA的病因学以及发病机制中重视T细胞的作用被视为是认识这种顽症的里程碑。许多RA的急性感染中T细胞的明显渗透提示其可能是主要参与者。目前较为流行的观点是RA为抗原提呈细胞(APC)和CD4+细胞互相作用的结果。APC呈现复杂的主要组织相容性复合物II类分子(MHC-II)和抗原多肽，与T细胞表面受体(TCR)结合，随之巨噬细胞等被激活并分泌前炎症细胞因子如IL-1和TNF-α等。这些细胞因子激活关节软骨周围的滑膜成纤维细胞和软骨细胞分泌降解糖蛋白和胶原的多种酶，从而导致组织破坏。现已普遍认为，巨噬细胞因子，尤其是IL-1和TNF-α是RA重要的炎症介质，在炎症的发生和发展中具有非常重要的作用；TNF-α和IL-1的抑制剂在RA治疗中取得了良好的疗效，这充分支持了细胞因子在RA中发挥着重要作用的观点。目前认为IL-1是参与RA进展期关节破坏的典型前炎症细胞因子，而TNF-α在RA的炎症反应过程中具有关键位置。

目前，对于低分子肝素的研究多集中在其抗凝功能中，而在类风湿关节炎中的作用尚无报道。

发明内容

为了解决现有技术中的问题，提供低分子肝素的新用途。

为实现上述目的，本发明采取的技术方案为：一种低分子肝素在制备治疗风风湿性疾病药物中的应用。

所述的风湿性疾病是类风湿性关节炎。

依据上述技术方案，本发明的具体实施方法是：

1)胶原诱导性关节炎动物模型的建立

2)确定了低分子量肝素用于体内抗炎治疗的可行性及有效剂量：

1.1实验分组及治疗方案

1.1.1分组：造模后观察单侧踝或腕关节评分达2分后依次选入NS组、肝素高剂量组、肝素低剂量组、MTX组。同时开始药物干预。记录每只大鼠干预时间。同时设有未免疫的做对照。

1.1.2药物干预剂量：

1)MTX(1mg/只/周)腹腔注射

2)肝素高剂量(Hep-H)皮下注射

3)肝素低剂量(Hep-L)皮下注射

4)NS组处理同肝素低剂量组用生理盐水代替肝素

1.1.3观察指标：

每只大鼠分别于入组治疗后第21天处死，

1)取脾细胞做增殖实验，

2)取心脏血用于测定血清中的TNF-及anti-CII antibody

3)取病变肢体用于拍钼靶片及HE染色和组化分析

本发明的有益效果：

1、本发明发掘了低分子肝素的医疗用途，开拓了一个新的应用领域。

2、本发明结果表明低分子肝素具有抑制类风关滑膜炎症的作用，其作用途径之一是抑制滑膜成纤维细胞与炎症细胞的黏附。这一结果为寻找生物治疗和其他小分子药物治疗靶点提供实验依据，具有临床应用价值。

附图说明

图1是大鼠踝关节钼靶摄片；

图2是不同放大倍数的关节组织病理切片结果图片；