[发明专利]肺炎克雷伯氏菌及其制备氢气和2,3-丁二醇的方法无效
申请号: | 200910046726.8 | 申请日: | 2009-02-26 |
公开(公告)号: | CN101531979A | 公开(公告)日: | 2009-09-16 |
发明(设计)人: | 张旭;牛坤;谭文松 | 申请(专利权)人: | 华东理工大学 |
主分类号: | C12N1/20 | 分类号: | C12N1/20;C12P3/00;C12P7/18;C12R1/22 |
代理公司: | 上海翼胜专利商标事务所(普通合伙) | 代理人: | 翟 羽 |
地址: | 200237*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 肺炎 克雷伯氏菌 及其 制备 氢气 丁二醇 方法 | ||
1.一种肺炎克雷伯氏菌,其特征在于,肺炎克雷伯氏菌为Klebsiellapneumoniae ECU-21,在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)登记保藏,保藏日期为2009年01月06日,保藏编号为CGMCCNo.2850。
2.一种利用权利要求1所述的肺炎克雷伯氏菌制备氢气和2,3-丁二醇的方法,其特征在于,具体步骤为:
(1)Klebsiella pneumoniae ECU-21种子培养
从平板上取一环菌落接入种子培养基,培养基组成为:
葡萄糖4.5~5.5g/L,酵母粉4.5~5.5g/L,蛋白胨9.5~10.5g/L,牛肉膏5.5~6.5g/L,NaCl4.5~5.5g/L,KH2PO40.05g/L,K2HPO40.05g/L,灭菌后pH为6.0~6.2,摇瓶体积为250ml,装液量为30ml,在培养箱中静置培养12小时,培养温度为37℃;
(2)Klebsiella pneumoniae ECU-21发酵培养
将培养过的种子培养基接入600ml发酵培养基中,接种量为5%,发酵反应在1L摇瓶中进行,发酵培养基组成为:
葡萄糖29~31g/L,酵母粉4.5~5.5g/L,蛋白胨9.5~10.5g/L,牛肉膏5.5~6.5g/L,NaCl4.5~5.5g/L,磷酸盐缓冲液200mM,pH为6.0~6.2;接种后用橡胶塞密封发酵摇瓶,然后通入N2吹扫使之形成厌氧培养环境,多余气体由排气口排出,气体排净后采用气袋连接排气口收集发酵产生的氢气,从液相产物中得到2,3-丁二醇;培养温度为37℃,采用磁力搅拌器进行搅拌,转速为150rpm,培养时间为12~15h。
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