[发明专利]N端缺失型p43蛋白及其在肿瘤治疗药物中的应用

说明书

技术领域

本发明涉及缺失型重组人p43蛋白及其在肿瘤治疗药物中的应用。

背景技术

恶性肿瘤是威胁人类健康的大敌，医学界对恶性肿瘤的治疗主要采取杀死 癌细胞为主的方法，即：手术、化疗、放疗等。这些方法在杀死癌细胞的同时 也损伤正常细胞，并且容易使肿瘤细胞产生耐药性。因而，人们一直在探索一 种能专一性地杀死肿瘤细胞且不损伤正常细胞，同时又不易使肿瘤产生耐药性 的治癌方法。目前用于治疗肿瘤的新药层出不穷。近年来，随着分子生物学技 术的快速发展，人们逐渐关注运用基因工程药物治疗恶性肿瘤的方法。传统的 肿瘤化疗大多使用细胞毒性药物，在杀死肿瘤细胞的同时也对正常细胞造成损 害，削弱人的体质。所以很多癌症晚期患者最后多因为无法承受治疗而致死亡。 恶性肿瘤有一个共同的特性，那就是局部的细胞疯狂地、不受遏制地增殖，而 维持这种增殖就意味着需要大量营养供应。在肿瘤形成的同时，瘤体的内部及 周围会形成大量供应养分的血管。那么如果能切断这些供养“管道”，阻断肿 瘤的营养来源，肿瘤也就会衰竭而死。

当前兴起的新生血管抑制疗法为彻底治疗肿瘤带来了曙光。研究发现肿瘤 特别是实体瘤的生长需要大量的营养供应，在肿瘤周围会形成大量的新生血 管。抗血管生成疗法主要是通过抑制快速异常增殖的血管内皮细胞的生长，特 异性抑制肿瘤血管内皮细胞增殖，从而达到阻止肿瘤血管生成，使肿瘤毛细血 管发生萎缩，切断肿瘤的营养供应，使肿瘤细胞凋亡或退化到最初的休眠状态， 从而达到治疗癌症的目的。

经过近十年的不断努力，现在已发现了多种有希望成为肿瘤治疗药物的新 生血管抑制剂。其中最具代表性的是人血管内皮抑制素(human endostatin)。 有关人血管内皮抑制素(Endostatin)国际上首先报道是1997年1月Cell杂志 上刊登的美国哈佛医学院福尔克曼(Folkman)研究小组的鼠内皮抑素基因的 论文，该研究发现Angiostatin和Endostatin可以消除小鼠体内恶性肿瘤，而且 未再复发。这两种药物是以阻止为肿瘤提供营养的血管的生长从而治疗肿瘤 的。当时引起了国际轰动，Endostatin迅速成为肿瘤治疗领域的研究热点。美 国FDA在没有完成临床前研究的情况下特批30例对其它药物已无反应的晚期 癌症病人于99年初用人血管内皮抑制素(Angiostatin)和鼠内皮抑素 (Endostatin)混合基因工程针剂进行临床试验。。目前，Endostatin已经通过 了FDA的一期临床，目前正处于二期临床阶段。但由于Endostatin的溶解性较 差，使得它的制备成本升高，同时在使用上也只能采用水针剂型，这使它的应 用受到了很大的限制。

p43蛋白是哺乳类动物氨酰tRNA合成酶的辅助因子，一方面直接调节内 皮细胞形成毛细血管的生理过程，另一方面通过改变微环境来抑制肿瘤血管的 生成。p43蛋白的抗血管生成活性及抑制肿瘤生长作用已经在体外及动物实验 获得证实。人基因重组p43蛋白显示出其被开发成新型治疗癌症药物的潜力， 对抗多种原发性和转移性实体肿瘤均有效，并可与化疗和放疗协同治疗。

p43蛋白作为人体氨酰tRNA合成酶系的家族成员并且是内皮单核细胞激 活肽的前体于1997年被Sophie Q等人发现。p43蛋白为单链蛋白，全长312 个氨基酸，二级结构含有11个β片层。韩国Imagene公司(WO01/95927)对 人p43蛋白的结构、生物活性进行了深入的研究，结果显示人p43蛋白可以 抑制快速异常增殖的血管内皮细胞的生长，以及抑制鸡胚尿囊膜新生血管生 成，这说明p43蛋白具有潜在的抗肿瘤作用。

但是，目前仍需要对p43蛋白进一步改进，得到抗肿瘤效果更好的药物。

发明内容

本发明的发明人经过大量研究发现，将p43蛋白的312个氨基酸的一部分 切除得到的缺失型p43蛋白具有更高的抗肿瘤活性。

因此，本发明的一个目的是提供缺失型p43蛋白，其具有更高的抗肿瘤活 性。

本发明的另一个目的是提供缺失型p43蛋白在治疗抗肿瘤药物中的用途。

本发明的还有一个目的是提供一种用于抗肿瘤的药物组合物，它包含缺失 型p43蛋白。

本发明一方面提供了一种缺失型p43蛋白，它包括SEQ ID NO：1所示氨基 酸序列中缺失第1-100位氨基酸所得到的蛋白。