[发明专利]一种基于纳米金与核酸结构的比色检测法及其试剂盒无效
申请号: | 200910047300.4 | 申请日: | 2009-03-10 |
公开(公告)号: | CN101832936A | 公开(公告)日: | 2010-09-15 |
发明(设计)人: | 樊春海;王丽华 | 申请(专利权)人: | 苏州市长三角系统生物交叉科学研究院有限公司 |
主分类号: | G01N21/78 | 分类号: | G01N21/78 |
代理公司: | 上海智信专利代理有限公司 31002 | 代理人: | 薛琦;朱水平 |
地址: | 215128 江苏省苏州市*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 基于 纳米 核酸 结构 比色 检测 及其 试剂盒 | ||
1.一种基于纳米金与核酸结构的比色检测法,其特征在于,包括以下步骤:
1)将能与靶分子特异性结合的特异性DNA与待检溶液混合,进行反应;
2)将步骤1)的反应溶液与摩尔数为特异性DNA的0.01~1倍的纳米金溶液混合,进行反应;
3)加入反应浓度在10~600mM之间的盐溶液,观察溶液颜色变化。
2.根据权利要求1所述的靶分子的比色检测法,其特征在于,步骤1)所述的靶分子为三磷酸腺苷、可卡因、血小板衍生性生长因子、凝血酶、溶菌酶、汞离子或氢离子;所述的特异性DNA为三磷酸腺苷、可卡因、血小板衍生性生长因子、凝血酶或溶菌酶的核酸适体,特异性结合汞离子的寡核苷酸或具有i-motif结构的寡聚核苷酸。
3.根据权利要求1所述的比色检测法,其特征在于,步骤1)所述的特异性DNA的反应浓度为1~50μM,待检溶液中靶分子的反应浓度为1~1000μM,待检溶液中靶分子与特异性DNA的摩尔比为1∶1~1∶100。
4.根据权利要求1所述的比色检测法,其特征在于,步骤1)所述的反应在缓冲溶液中进行。
5.根据权利要求1所述的比色检测法,其特征在于,步骤1)的反应温度为4~37℃,反应时间为1~30分钟。
6.根据权利要求1所述的比色检测法,其特征在于,步骤2)所述的纳米金溶液的反应浓度为1~100nM。
7.根据权利要求1所述的比色检测法,其特征在于,步骤2)的反应温度为4~37℃,反应时间为1~5分钟。
8.根据权利要求1所述的比色检测法,其特征在于,步骤3)所述观察溶液颜色变化的方法为目视比色法或分光光度法。
9.一种采用权利要求1~8任一项所述的比色检测法进行检测靶物质的试剂盒,其特征在于,包含
1)能与靶分子特异性结合的特异性DNA;
2)纳米金溶液;
3)盐溶液。
10.根据权利要求9所述的试剂盒,其特征在于,所述的纳米金溶液中的纳米金的粒径为10~20nm。
11.根据权利要求9所述的试剂盒,其特征在于,所述的纳米金溶液的浓度为1~100nM。
12.根据权利要求9所述的试剂盒,其特征在于,所述的盐溶液为下述盐的溶液:MX/M’X2,M=Na+/K+,M’=Mg2+/Ca2+,X=Cl-/Br-/I-/NO3-/ClO4-。
13.根据权利要求9所述的试剂盒,其特征在于,所述的盐溶液的浓度为0.2~1M。
14.根据权利要求9所述的试剂盒,其特征在于,所述的盐溶液中含有的缓冲体系。
15.根据权利要求9所述的试剂盒,其特征在于,所述的缓冲体系为常规的Tris、PBS或胂酸盐体系。
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