[发明专利]西沙海绵中一种环八肽类化合物及其用途

说明书

技术领域

本发明涉及医药技术领域，是产自西沙群岛附近海域的海洋动物棕色扁海绵Phakellia fusca中的一种具有抗肿瘤活性的新的环八肽类化合物。

背景技术

海绵是一种低等的多细胞动物，其分布广泛，但常含有很多结构罕见的具有抗癌活性的次生代谢产物，因此一直是海洋天然产物化学家首选海洋生物研究对象。本发明的药源材料Phakellia fusca海绵属寻常纲(Demospongiae)软海绵目(Halichondrida)小轴海绵科(Axinellidae)海绵。2002年，曾从我国南海西沙永兴岛上采集的P.fusca海绵中发现了1个新的环肽phakelliastatin 12并已申请专利(申请号：01113389.9)。之前的所有Phakellistatins类环肽化合物均是由美国亚利桑那州立大学Pettit小组从Phakellia属海绵中发现的，但至今未见有关具有抗肿瘤活性的新的环八肽类化合物的报道。

发明内容

本发明提供一种从中国西沙群岛附近海域的棕色扁海绵中分离到的具有抗肿瘤活性的新的环八肽类化合物，包括两个化合物，经质谱和核磁共振等光谱技术检测分析，其化学结构通式如下：

其中，基团R1表示或

R2表示CH(CH₃)₂或CHCH₃(CH₂CH₃)，

R3表示CH₂CH(CH₃)₂或CH₂CH(CH₃)₂，

R4表示CHCH₃(CH₂CH₃)或CHOH(CH₃)，

R5表示CHCH₃(CH₂CH₃)或CH₂CH(CH₃)₂，

本发明化合物R1～R5的基团搭配如下：

化合物1.               化合物2.

R1.                  

R2    CH(CH₃)₂         CHCH₃(CH₂CH₃)

R3    CH₂CH(CH₃)₂      CH₂CH(CH₃)₂

R4    CHCH₃(CH₂CH₃)    CHOH(CH₃)

R5    CHCH₃(CH₂CH₃)    CH₂CH(CH₃)₂。

本发明化合物的制备方法如下：

1.提取，制备总提物：

将干燥的棕色扁海绵(P.fusca)粉碎后，按常规用95％乙醇冷浸提取，得提取液，将提取液浓缩得浸膏，加入50％的乙酸乙酯水溶液进行提取，得乙酸乙酯总提物；

2.分离纯化：

1)制备粗提物：将乙酸乙酯总提物用90％甲醇混悬，按常规经石油醚脱脂后，加水将混悬液的甲醇浓度调至60％，用二氯甲烷萃取，浓缩萃取液，得粗提物；

2)分离纯化环肽类化合物：将上述粗提物过Sephadex LH-20凝胶柱，用体积比CH₂Cl₂-MeOH＝1∶1的洗脱液洗脱，根据薄层层析检识的结果，收集含有环肽类化合物的洗脱液部分，再进行反相硅胶柱色谱，以体积比为1∶1-1∶0的甲醇/水混合溶剂梯度洗脱，再以反相高效液相(55％甲醇/水，流速1.5ml/min，检测波长为280nm)，分别得到化合物1和化合物2。

体外活性试验证明其对P388、BEL-7402、SPC-A-1、HAC和Colo-26等多种不同的肿瘤细胞均有明显的抑制活性。因此可用于制备抗肿瘤药物。