[发明专利]一种利用发酵法去除棕榈仁粕中抗营养因子的方法

权利要求书

1.一种利用发酵法去除棕榈仁粕中抗营养因子的方法，其特征在于，采用微生物混菌固态发酵来降解棕榈仁粕中的抗营养因子，提高棕榈仁粕作为饲料的营养价值的方法，包括以下步骤：

第一步，发酵菌种的制备：发酵菌种为芽孢杆菌和酵母菌，芽孢杆菌和酵母菌需要进行一级种子培养和二级种子扩培，培养温度为25-45℃，培养时间为12-48h，转速为120-200r/min，分别制备成芽孢杆菌种子液和酵母菌种子液；

第二步，原料与芽孢杆菌种子液和酵母菌种子液的混合：粉碎的棕榈仁粕中加入一定量的水后于121℃灭菌15min，然后分别接入芽孢杆菌种子液和酵母菌种子液，芽孢杆菌种子液和酵母菌种子液的接入量为为棕榈仁粕质量的5-20％，充分混合均匀，混合后物料的水分控制在30-70％；

第三步，发酵处理的控制：所述混合物料置于30-60℃的温度下进行发酵，保温5-15天后，得到发酵产物。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤(1)中芽孢杆菌种子液的制备，

1)一级种子培养：从斜面芽孢杆菌的菌种挑取一环菌体到装有10ml种子培养基的250ml三角瓶中，置于恒温调速摇床中进行菌体培养，转速为170r/min，30-40℃培养24小时；

2)二级种子扩培：吸取5ml一级种子培养液到装有100ml种子培养基的500ml三角瓶中，置于恒温调速摇床中进行菌体培养，转速为150-170r/min，37℃培养24小时，备用；

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于：所述斜面培养基为(g/L)：牛肉膏3g，蛋白胨10g，氯化钠5g，琼脂20g，pH值7.0-7.2，121℃灭菌20min；所述种子培养基(g/L)：牛肉膏3g，蛋白胨10g，氯化钠5g，pH值7.0-7.2，121℃灭菌20min；

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤(1)中酵母菌种子液的制备，

1)一级种子培养：从保藏的斜面酵母菌的菌种挑取一环菌体到装有10ml种子培养基的250ml三角瓶中，置于恒温调速摇床中进行菌体培养，转速为150r/min，30-40℃培养24小时；

2)二级种子扩培：吸取5ml一级种子培养液到装有100ml种子培养基的500ml三角瓶中，置于恒温调速摇床中进行菌体培养，转速为150-170r/min，25-35℃培养24小时，备用；

5.根据权利要求3所述的方法，其特征在于：斜面培养基(g/L)：葡萄糖20g，蛋白胨10g，酵母膏5g，琼脂20g，121℃灭菌15min；种子培养基(g/L)：葡萄糖20g，蛋白胨10g，酵母膏5g，121℃灭菌15min。

6.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述芽孢杆菌培养温度为37℃，培养时间为24h，转速为170r/min。

7.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，发酵菌种为酿酒酵母菌，所述酿酒酵母菌的培养温度为30℃，培养时间为24h，转速为150r/min。

8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤(2)中所述棕榈仁粕粉碎至大小为3-8mm左右，以提高与菌种的接触面积，使发酵过程更加彻底，将原料与菌种混合。

9.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤(3)中混合物料调pH5-9，置于30-40℃的温度下进行发酵5-15天，

10.根据权利要求9所述的方法，其特征在于，所述混合物料调pH6，置于温度为40℃，发酵时间为10-15天。