[发明专利]百子莲的组织培养方法

权利要求书

1.百子莲的组织培养方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：

(1)无菌材料的获得

在百子莲开花时，摘取未开花的花苞，用自来水冲洗1-3h后于超净工班工作台上，依次利用质量浓度为60-75％的乙醇浸泡10-50s，体积浓度为0.5-2‰的汞浸泡10-30min，再用无菌水冲洗4-6次，利用无菌滤纸吸干花苞表面的水分后，将花苞接种于花苞诱导培养基上；

(2)球茎的分化和增殖

花苞接种于花苞诱导培养基上，1-3周后花苞开始膨大，出现白色突起，3-5周后可见芽分生组织，再培养1-2个月，有小球茎生成，将小球茎切下移入球茎增殖培养基中进行增殖培养，球茎基部的愈伤组织较多，但球茎生长发育良好，无玻璃化等不良现象；

(3)球茎壮苗培养

将球茎增殖培养基上诱导出的球茎转至壮苗培养基上生长，20-40天后可以长成0.2-0.5cm的球茎；

(4)生根培养

取0.2-0.5cm的球茎，转接入生根培养基中诱导生根，10-20天后幼苗基部分化出白色的根原基，30-35天后可以长至2-4cm，根系粗壮，须根众多，生根率为90-100％；

(5)炼苗与移栽

生根培养30-35天，根系长至0.5-1cm时，选择根系发达、生长健壮的无菌苗，于室内开瓶炼苗1-3天，然后将苗取出，洗净根部的琼脂，栽于温室的苗床中驯化30-50天，即可移栽室外上盆或地栽，给予肥水管理，最终的移栽成活率为90-100％。

2.根据权利要求1所述的百子莲的组织培养方法，其特征在于，所述的花苞诱导培养基包括MS+6-BA1.0-5.0mg/L+NAA0.1-0.5mg/L。

3.根据权利要求2所述的百子莲的组织培养方法，其特征在于，所述的花苞诱导培养基优选MS+6-BA5.0mg/L+NAA0.5mg/L。

4.根据权利要求1所述的百子莲的组织培养方法，其特征在于，所述的球茎增殖培养基包括MS+6-BA0.5-4.0mg/L+NAA0.1-0.3mg/L。

5.根据权利要求4所述的百子莲的组织培养方法，其特征在于，所述的球茎增殖培养基优选MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.2mg/L。

6.根据权利要求1所述的百子莲的组织培养方法，其特征在于，所述的壮苗培养基包括MS+6-BA0.5-2.0mg/L+NAA0.1-0.3mg/L。

7.根据权利要求6所述的百子莲的组织培养方法，其特征在于，所述的壮苗培养基优选MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L。

8.根据权利要求1所述的百子莲的组织培养方法，其特征在于，所述的生根培养基包括MS+NAA0.1-0.3mg/L。

9.根据权利要求8所述的百子莲的组织培养方法，其特征在于，所述的生根培养基优选MS+NAA0.1mg/L。

10.根据权利要求2或4或6或8所述的百子莲的组织培养方法，其特征在于，所述的培养基还包括蔗糖20-40g/L、琼脂粉4-8g/L，培养基pH5.5-6.0，培养温度24-26℃，光照1500-2500lx。