[发明专利]一种重组人骨形态发生蛋白-2壳聚糖微球及其制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及药物以及包裹生物活性因子微球技术领域，更具体地涉及一种 重组人骨形态发生蛋白-2壳聚糖微球及其制备方法和用途。

背景技术

重组骨形态发生蛋白-2是采用基因工程重组技术开发的一种骨分化调节 生长因子，具有诱导未分化的间充质细胞向软骨细胞和成骨细胞定向分化的能 力，促进成骨细胞分化成熟，参与骨和软骨的生长发育及其重建过程，进而加 速骨缺损的修复。但重组骨形态发生蛋白-2在体内半衰期短，局部使用会被组 织液稀释或蛋白酶所分解，能保持有效浓度的时间有限，不能有效发挥其骨诱 导作用。所以重组骨形态发生蛋白-2的活性发挥必须需要有合适的载体，以便 长时间缓慢地释放重组骨形态发生蛋白-2，实现在一定时间内保持局部较高的 浓度，利于其有效发挥诱导成骨作用。

微球作为一种控/缓释给药体系，具有保护药物免遭破坏、延长药物作用 时间、降低用药量等优点，在药物释放领域受到很大关注。目前已有一些相关 制备重组骨形态发生蛋白-2微球的报道，然而它们都或多或少存在一些明显的 缺陷，例如制备步骤复杂，控释效果难以令人满意，以及杂质和反应物(如残留 的单体、低聚物、催化剂、添加剂及降解产物)对产品性能有可能产生不良的 影响。

Antonios G Mikos等(P.Quinten Ruhe，Elizabeth L.Hedberg，Nestor Torio Padron，Paul H.M.Spauwen，John A.Jansen，Antonios G.Mikos. rhBMP-2 release from injectable poly(DL-lactic-co-glycolic acid)/ calcium-phosphate cement composites.J Bone Joint Surg Am 2003；85-A Suppl 3：75-81.)采用复乳法制备载重组骨形态发生蛋白-2的DL-乳酸/乙 醇酸共聚物(PLGA)微粒。在该方法中，重组骨形态发生蛋白-2溶于磷酸缓冲盐 溶液/牛血清白蛋白溶液中，然后注入PLGA的二氯甲烷溶液中形成初乳，漩涡 震荡60秒后加入聚乙烯醇溶液形成复乳。漩涡震荡60秒后加入PVA和异丙醇 溶液，快速搅拌1小时后加入二氯甲烷促使微粒析出，经离心冻干后得微球。 平均粒径为17.2±1.3μm，包封率为79％±8％，28天累积释放率为18％±1.9％。

胡蕴玉等人采用复乳-溶剂蒸发技术制备载重组骨形态发生蛋白-2的聚乳 酸与聚乙醇酸共聚物(PLGA)微球。制备的载药微球粒径在100～350μm，24 小时体外释放为15.2％±0.8％，随后呈持续缓慢释放，28天时累积释放率达 48.6％±5.3％。