[发明专利]检测乙烯雌酚的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种化工技术领域的检测方法，具体是一种检测乙烯雌酚(DES)的方法。

背景技术

乙烯雌酚(Diethylstilbestrol，DES)诞生于20世纪40年代，是一种具有酚羟基结构的人工合成雌激素，有顺式和反式两种异构体，其中反式的生理活性较强。由于DES具有促进动物增重，增加蛋白质沉积和减少脂肪沉积的作用，曾被广泛用于促进动物生长、增加瘦肉率、提高饲料转化率。20世纪70年代后期，由于发现DES具有生殖和遗传毒性(包括致癌和致畸作用)。因此，美国从1979年开始禁止使用DES作为食品动物的促生长剂，欧盟从1986年禁止使用DES用于食品动物并限制进口其他国家使用过该药的动物生产的食品，2002年我国农业部第176号公告和第193号公告中规定禁止使用DES。2004年4月4日，中华人民共和国农业部发布《2003年度动物性产品中兽药残留监控计划》(农牧发[2003]6号)，对乙烯雌酚在动物性食品中要求零检出。但在畜牧养殖业中非法添加DES情况不时出现，对食品中乙烯雌酚的残留检测引起国内外的高度重视，因而建立快速，灵敏并能实现现场检测乙烯雌酚的方法非常必要。

目前国内外文献报道用于DES残留检测的方法很多，主要有免疫学方法：放射免疫法(RIA)、酶联免疫法(ELISA)等；色谱学方法：如高效液相色谱法(HPLC)、高效液相色谱-串联质谱检测法(HPLC-MS)、气相色谱法(GC)、气相色谱-质谱联用法(GC-MS)、薄层色谱法(TLC)等；其他方法：如循环伏安法、分光光度法、荧光分光光度分析法、毛细管电泳法、流动注射化学发光分析法以及生物分析法等。在这些方法中，高效液相色谱分析法是GB/T14931.2-1994畜禽肉中乙烯雌酚的测定方法，该方法具有灵敏、准确、精密、杂质干扰少，具有较高可重复性、权威性等优点。但是该方法也有实验仪器昂贵、保养程序复杂、设备对环境要求较高、技术含量较高、试剂毒性较大、单个样品检测成本较高、样品前处理复杂等缺点；气相色谱-质谱法，放射免疫法以及带电子捕获检测器的气相色谱法是目前已有的最能有效，灵敏地测定DES ppb水平含量的检测方法，但由于乙烯雌酚具有极性，且沸点较高，需要繁琐的衍生化步骤，从而限制了气相色谱分析的应用。以上这些分析方法均需要大型分析仪器，操作过程繁琐，不能实现现场检测。

发明内容

本发明的目的在于克服现有技术的不足，提供一种检测乙烯雌酚的方法。本发明具有方法和设备简单，检测速度快以及检测成本低等优点，可用于食品中DES的快速现场检测。

本发明是通过以下技术方案实现的，

将待测样品进行预处理，制备样品溶液，然后进行如下处理：

步骤一，在纸层析条的一端点加样品溶液；

步骤二，将纸层析条置于正己烷-乙醇展开剂内，当展开剂前沿接近纸层析条前沿时，取出纸层析条，风干；

所述正己烷-乙醇展开剂为：按体积计算，正己烷1～20份，乙醇0.1～5份，混合而得；

步骤三，将铁氰化钾-三氯化铁-H₂O₂喷在层析条上，显色；

所述铁氰化钾-三氯化铁-H₂O₂为：按体积比为1∶1将0.01～5Mole/L的铁氰化钾的水溶液与0.01～5Mole/L的三氯化铁的水溶液混合均匀，再加入质量分数为0.001％～5％的H₂O₂，其中加入H₂O₂的体积占溶液总体积的0～10％。

所述样品溶液为禽类或畜类样品溶液。

步骤一中，所述点加具体为，在纸层析条一端的1～2cm处，用进样毛细管点加样品溶液，使样品溶液在纸层析条上成为直径为3～7mm的圆点。

步骤二中，所述接近具体为，当展开剂前沿距纸层析条前沿1～2cm。

步骤三中，所述显色具体为，显色之前在层析条上再喷质量分数为1％的冰乙酸。

本发明利用乙烯雌酚酚羟基的还原性，使铁氰化钾-三氯化铁试液生成普鲁士蓝沉淀，该沉淀在强酸性溶液中溶解。

本发明具有如下的有益效果：本发明具有方法和设备简单，检测速度快以及检测成本低等优点，可用于食品中DES的快速现场检测。

具体实施方式

本实施例在以本发明技术方案为前提下进行实施，给出了详细的实施方式和过程，但本发明的保护范围不限于下述的实施例。下列实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件，或按照制造厂商所建议的条件。

实施例1