[发明专利]适于动物细胞产品生产的无动物来源低蛋白培养基有效
申请号: | 200910053506.8 | 申请日: | 2009-06-19 |
公开(公告)号: | CN101603026A | 公开(公告)日: | 2009-12-16 |
发明(设计)人: | 谭文松;赵亮;周燕;陈飞 | 申请(专利权)人: | 华东理工大学 |
主分类号: | C12N5/06 | 分类号: | C12N5/06;C12P21/02;C12P21/08 |
代理公司: | 上海翼胜专利商标事务所(普通合伙) | 代理人: | 刁文魁;翟 羽 |
地址: | 200237*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 适于 动物 细胞 产品 生产 来源 蛋白 培养基 | ||
1.一种适于动物细胞产品生产的无动物来源低蛋白培养基,适用于CHO细胞的培养,其特征在于,采用大豆水解物替代动物来源成分,采用硫酸亚铁、硝酸铁和EDTA·2Na的组合物替代转铁蛋白,其成分包括基础代谢营养物类、维生素类、转铁蛋白替代物、脂类、核酸类、激素及生长因子类、抗氧化剂类、抗剪切保护剂、pH指示剂、pH缓冲剂和其他无机盐类;
——所述的基础代谢营养物类包括:葡萄糖、大豆水解物、丙酮酸钠、谷氨酰胺、丙氨酸、精氨酸、天冬酰胺、天冬氨酸、半胱氨酸、胱氨酸、谷氨酸、甘氨酸、组氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、赖氨酸、甲硫氨酸、苯丙氨酸、脯氨酸、丝氨酸、苏氨酸、色氨酸、酪氨酸、缬氨酸;
——所述的维生素类包括:生物素、维生素B12、氯化胆碱、叶酸、肌醇、烟酰胺、泛酸钙、维生素B6、核黄素、维生素B1、硫辛酸;
——所述的转铁蛋白替代物类包括:硫酸亚铁、硝酸铁、EDTA·2Na;
——所述的脂类包括:乙醇胺、吐温80、鱼肝油、胆固醇、亚油酸;
——所述的核酸类包括:胸苷、次黄嘌呤;
——所述的激素及生长因子类包括:孕酮、氢化可的松、重组胰岛素、腐胺;
——所述的抗氧化剂类包括:亚硒酸钠、生育酚、牛磺酸;
——所述的抗剪切保护剂为嵌段式聚醚F68;
——所述的pH指示剂为酚红;
——所述的pH缓冲剂包括碳酸氢钠、Hepes;
——所述的其他无机盐类包括:氯化钙、氯化镁、硫酸镁、氯化钾、磷酸二氢钠、氯化钠、磷酸氢二钠、硫酸锌、硫酸铜。
2.根据权利要求1所述的适于动物细胞产品生产的无动物来源低蛋白培养基,其特征在于,在三次蒸馏水中溶解以下组分,其各种成分如下,单位为毫克/升:
葡萄糖 2000~7000
大豆水解物 500~1000
丙酮酸钠 55~220
谷氨酰胺 200~900
丙氨酸 4~15
精氨酸 100~300
天冬酰胺 6~15
天冬氨酸 6~15
半胱氨酸 15~50
胱氨酸 30~65
谷氨酸 5~20
甘氨酸 15~40
组氨酸 15~40
异亮氨酸 50~100
亮氨酸 50~150
赖氨酸 80~185
甲硫氨酸 15~35
苯丙氨酸 30~70
脯氨酸 10~34.5
丝氨酸 20~52.5
苏氨酸 50~107
色氨酸 9~18
酪氨酸 55~120
缬氨酸 50~120
生物素 0.0035~0.0105
维生素B12 0.50~2.50
氯化胆碱 8.50~30
叶酸 2.50~8
肌醇 12~30
烟酰胺 2~7
泛酸钙 2~8
维生素B6 2~8
核黄素 0.2~0.7
维生素B1 2~8
硫辛酸 0.08~0.50
硫酸亚铁 0.417~5
硝酸铁 0.05~0.8
EDTA·2Na 2~10
乙醇胺 3~10
吐温80 0.24~0.5
鱼肝油 0.1~0.2
胆固醇 0.045~0.1
亚油酸 0.042~0.084
胸苷 0.4~2.5
次黄嘌呤 2~20
孕酮 0.003~0.012
氢化可的松 0.036~0.072
重组胰岛素 3~8
腐胺 0.08~20
亚硒酸钠 0.02~0.08
生育酚 1~4
牛磺酸 20~50
嵌段式聚醚F68 500~2000
酚红 8.1
碳酸氢钠 2450
Hepes 2000~5000
氯化钙 110~150
氯化镁 40~75
硫酸镁 45~65
氯化钾 310~400
磷酸二氢钠 60~120
氯化钠 6995.5
磷酸氢二钠 55~120
硫酸锌 0.432~1.25
硫酸铜 0.0013~0.0065。
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