[发明专利]适于动物细胞产品生产的无动物来源低蛋白培养基有效

专利信息
申请号: 200910053506.8 申请日: 2009-06-19
公开(公告)号: CN101603026A 公开(公告)日: 2009-12-16
发明(设计)人: 谭文松;赵亮;周燕;陈飞 申请(专利权)人: 华东理工大学
主分类号: C12N5/06 分类号: C12N5/06;C12P21/02;C12P21/08
代理公司: 上海翼胜专利商标事务所(普通合伙) 代理人: 刁文魁;翟 羽
地址: 200237*** 国省代码: 上海;31
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摘要:
搜索关键词: 适于 动物 细胞 产品 生产 来源 蛋白 培养基
【权利要求书】:

1.一种适于动物细胞产品生产的无动物来源低蛋白培养基,适用于CHO细胞的培养,其特征在于,采用大豆水解物替代动物来源成分,采用硫酸亚铁、硝酸铁和EDTA·2Na的组合物替代转铁蛋白,其成分包括基础代谢营养物类、维生素类、转铁蛋白替代物、脂类、核酸类、激素及生长因子类、抗氧化剂类、抗剪切保护剂、pH指示剂、pH缓冲剂和其他无机盐类;

——所述的基础代谢营养物类包括:葡萄糖、大豆水解物、丙酮酸钠、谷氨酰胺、丙氨酸、精氨酸、天冬酰胺、天冬氨酸、半胱氨酸、胱氨酸、谷氨酸、甘氨酸、组氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、赖氨酸、甲硫氨酸、苯丙氨酸、脯氨酸、丝氨酸、苏氨酸、色氨酸、酪氨酸、缬氨酸;

——所述的维生素类包括:生物素、维生素B12、氯化胆碱、叶酸、肌醇、烟酰胺、泛酸钙、维生素B6、核黄素、维生素B1、硫辛酸;

——所述的转铁蛋白替代物类包括:硫酸亚铁、硝酸铁、EDTA·2Na;

——所述的脂类包括:乙醇胺、吐温80、鱼肝油、胆固醇、亚油酸;

——所述的核酸类包括:胸苷、次黄嘌呤;

——所述的激素及生长因子类包括:孕酮、氢化可的松、重组胰岛素、腐胺;

——所述的抗氧化剂类包括:亚硒酸钠、生育酚、牛磺酸;

——所述的抗剪切保护剂为嵌段式聚醚F68;

——所述的pH指示剂为酚红;

——所述的pH缓冲剂包括碳酸氢钠、Hepes;

——所述的其他无机盐类包括:氯化钙、氯化镁、硫酸镁、氯化钾、磷酸二氢钠、氯化钠、磷酸氢二钠、硫酸锌、硫酸铜。

2.根据权利要求1所述的适于动物细胞产品生产的无动物来源低蛋白培养基,其特征在于,在三次蒸馏水中溶解以下组分,其各种成分如下,单位为毫克/升:

葡萄糖          2000~7000

大豆水解物      500~1000

丙酮酸钠        55~220

谷氨酰胺        200~900

丙氨酸          4~15

精氨酸          100~300

天冬酰胺        6~15

天冬氨酸        6~15

半胱氨酸        15~50

胱氨酸          30~65

谷氨酸          5~20

甘氨酸          15~40

组氨酸          15~40

异亮氨酸        50~100

亮氨酸          50~150

赖氨酸          80~185

甲硫氨酸        15~35

苯丙氨酸        30~70

脯氨酸          10~34.5

丝氨酸          20~52.5

苏氨酸          50~107

色氨酸          9~18

酪氨酸          55~120

缬氨酸          50~120

生物素          0.0035~0.0105

维生素B12       0.50~2.50

氯化胆碱        8.50~30

叶酸            2.50~8

肌醇            12~30

烟酰胺          2~7

泛酸钙          2~8

维生素B6        2~8

核黄素          0.2~0.7

维生素B1        2~8

硫辛酸          0.08~0.50

硫酸亚铁        0.417~5

硝酸铁          0.05~0.8

EDTA·2Na       2~10

乙醇胺          3~10

吐温80          0.24~0.5

鱼肝油          0.1~0.2

胆固醇          0.045~0.1

亚油酸          0.042~0.084

胸苷            0.4~2.5

次黄嘌呤        2~20

孕酮            0.003~0.012

氢化可的松      0.036~0.072

重组胰岛素      3~8

腐胺            0.08~20

亚硒酸钠        0.02~0.08

生育酚          1~4

牛磺酸          20~50

嵌段式聚醚F68   500~2000

酚红            8.1

碳酸氢钠        2450

Hepes           2000~5000

氯化钙          110~150

氯化镁          40~75

硫酸镁          45~65

氯化钾          310~400

磷酸二氢钠      60~120

氯化钠          6995.5

磷酸氢二钠      55~120

硫酸锌          0.432~1.25

硫酸铜          0.0013~0.0065。

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