[发明专利]β-葡萄糖基-Yariv试剂的制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及医药、化工技术领域，具体地说是一种β-葡萄糖基-Yariv试 剂的制备方法。

背景技术

β-葡萄糖基-Yariv试剂(β-D-glucosyl-Yariv reagent，βGlcY)，即： 1，3，5-三(4-β-D-葡吡喃糖氧基-氧化苯基偶氮基)-2，4，6-三羟基苯，是一 种人工合成的苯基偶氮染色剂，它对我们探究植物体中AGPs的分布和生理作 用有着十分重要的意义，该试剂可与阿拉伯半乳糖蛋白(AGPs)的糖基发生反 应形成红色沉淀。

目前，有关4-β-D-葡吡喃糖氧基-氧化苯基偶氮基的合成技术国内尚未见 研究报道。国外，最早是J.Yariv等人在1962年发表的文章(Yariv，J.； Rapport，M.M.；Graf，L.The interaction of glycosides and saccharides with antibody to the corresponding phenyl azo glycoside.Biochem.J. 1962，85，383-388.)中提出了β-D-葡萄糖苷Yariv试剂的合成方法。之后 I.Ganjian等人的文章(Ganjian，I.；Basile，D.V.Reductive syntheses of p-aminophenyl--D-glucoside and its conversion to-glucosyl Yariv reagent.Anal.Biochem.1997，246，152-155.)对其合成进行了改进，即 从对硝基苯基葡萄糖苷作为起始原料进行合成。以上这些合成方法存在着工艺 复杂、操作繁琐、产率较低，产率一般在20～40％左右，严重制约了β-D-葡 萄糖基-Yariv试剂的广泛应用和发展。

发明内容

本发明的目的是针对现有技术的不足而提供的一种β-葡萄糖基-Yariv试 剂的制备方法，工艺简单、操作方便，收率高，合成所用原料价廉易得，有机 溶剂和催化剂用量少，生产成本低，是一种很有应用前景的糖苷合成新方法。

实现本发明目的的具体技术方案是：一种β-葡萄糖基-Yariv试剂的制备 方法，特点是以对硝基苯基葡萄糖苷为原料合成对氨基苯基葡萄糖苷，然后经 还原、重氮、偶联反应制得具有如下结构式的β-葡萄糖基-Yariv试剂，制备 步骤包括：

a、对氨基苯基葡萄糖苷的制备

将硝基苯基葡萄糖苷与甲醇或乙醇按1∶50～200的质量体积比在反应器 内搅拌混合后，在金属催化剂下加氢反应0.5～10小时，加氢压力为0.1～1.0 MPa，反应温度25～100℃，反应结束后过滤，取滤液经减压浓缩得对氨基苯基 葡萄糖苷，减压浓缩的压力为3～4KPa，温度为30～40℃；

b、重氮盐的制备

将上述制备的对氨基苯基葡萄糖苷溶于水中，分别加入HCl溶液和亚硝酸 盐溶液混合后，在0～5℃的温度下重氮反应0.5～3小时得重氮盐溶液，对氨 基苯基葡萄糖苷与HCl、水、亚硝酸盐的摩尔比为1∶1.2～1.5∶1.2～1.5∶250～ 400；

c、偶联反应

将上述制备的重氮盐溶液滴加间苯三酚溶液搅拌混合后，用氢氧化钠溶液 调节pH至8.0～9.0，在0～5℃的温度下偶联反应1～5小时，反应结束后用 甲醇或乙醇混合，放置12～48小时，过滤沉淀物，经干燥后得β-葡萄糖基 -Yariv试剂，重氮盐溶液与间苯三酚的配比以重氮盐的硝基苯基葡萄糖苷含量 与间苯三酚的摩尔比为1∶0.25～0.6，甲醇或乙醇为分析纯与重氮盐溶液的体 积比为0.5～2∶1。

所述金属催化剂为钯催化剂(Pd/C)、铂催化剂(Pt/C)或雷呢镍催化剂 (Raney Ni)，催化剂的金属含量为5～25％重量比，金属催化剂的用量以金属 Pd、Pt或Ni与硝基苯基葡萄糖苷的摩尔比为0.01～10∶1。

所述HCl溶液的浓度为0.3～1.0M。

所述亚硝酸盐为亚硝酸钠或亚硝酸钾。

本发明与现有技术相比具有工艺简单、操作方便，收率高，合成所用原料 价廉易得，有机溶剂和催化剂用量少，生产成本低的优点，是一种很有应用前 景的糖苷合成新方法。

附图说明

图1为本发明试剂的¹H-核磁谱图