[发明专利]一种HURP基因的原位杂交检测试剂盒及其检测方法和应用

说明书

【技术领域】

本发明涉及一种试剂盒，具体地说关于一种HURP基因的原位杂交检测试剂盒及其检测方法和应用

【背景技术】

前列腺癌(prostatic carcinoma，prostatic cancer)是男性生殖系最常见的恶性肿瘤，发病随年龄而增长，其发病率有明显的地区差异，西欧和北美地区已高过肺癌，在男性是癌症死亡的第1位。我国以前发病率较低，但由于人口老龄化，近年来发病率有所增加，从1993年的每10万人的发病率1.7上升到2000年的10万分之4.55，到2005年上升到7.9。虽然这一发病率与其他肿瘤相比还相对较低，但对于城市男性来说，前列腺癌的发病率已在所有肿瘤中居第十位，应引起高度关注。前列腺癌的发病与年龄呈正相关：据国外统计，50岁以下男性很少发生，50～60岁发病占前列腺癌的1/3，70岁以上约占1/2，80岁以上约占3/4。前列腺癌的病因目前尚不完全清楚，大量临床研究提示，前列腺癌与性激素有关，特别是雄性激素与前列腺癌的发病存在非常明显的因果关系。雄性激素高的人群前列腺癌的发病，要比雄性激素低的人群高；而通过辠丸切除或各种药物减少雄性激素的合成，阻断雄性激素的作用可以达到治疗前列腺癌的目的。专家介绍说，前列腺癌与遗传有关，直系亲属中如果有前列腺癌的，其本人患前列腺癌的风险要比其他人高一倍。目前大家比较公认的是，前列腺癌与种族有关，前列腺癌在黑人中更为常见。也有研究提示，环境污染、淋球菌感染、前列腺增生、过量饮用咖啡和酒类等也与前列腺癌发生有关。此外，前列腺癌与饮食有关，长期高脂肪、高蛋白饮食与前列腺癌高度相关。专家介绍说，在2007年美国泌尿外科年会上，与会学者在讨论预防前列腺癌何种饮食最好时，大家得出的结论是中餐最好。传统中餐的特点是新鲜蔬菜多，肉食相对较少，还配有米饭和面条等主食，是一个合理的饮食结构。有专家认为，之所以欧美前列腺癌成为男性泌尿系统发病率最高的肿瘤，其中一个重要的原因就是与西餐的饮食结构有关。

由于前列腺癌在早期没有任何症状，患者往往容易错过最佳的治疗时机，导致诊疗难度加大。其实前列腺疾病是一种非常普通的男性疾病，发现得越早，治疗效果就越好。在大型义诊咨询活动中，北京大学第三医院为100位老年男性提供了免费的前列腺特异性抗原(PSA)检查。PSA是前列腺腺体和导管细胞分泌的一种蛋白质，正常时血中含量很少。一旦患有前列腺癌，PSA值将升高。PSA是目前公认有效的前列腺癌早期诊断方法，它可以敏感地确定前列腺癌的发生。由美国和瑞典科研人员进行的研究显示，男性在50岁之前进行PSA检测，可以提前25年预测前列腺癌的发生。与通常的直肠指诊、直肠超声检查比较，PSA具有测定结果客观、定量、无昼夜变化、不受检查者技术影响，以及测定方法更易为患者接受等优点。在多数情况下，PSA检测可以在前列腺发病初期就发现肿瘤，使更多的前列腺癌患者获得根治性手术的机会，提高肿瘤的治愈率。近来，PSA的诊断阳性率有所下降，许多病理切片已证实是前列腺癌但PSA的检测是阴性。因此，寻找更有临床意义的诊断指标非常迫切。

研究证明HURP(Hepatoma up-regulated protein)是肝癌上调蛋白。HURP基因的过度表达已被发现在前列腺癌中、膀胱移行细胞癌中，也发现在肝癌中、正常人不表达HURP基因。可作为前列腺癌侵袭转移的预测指标。随着分子生物技术日益完善，功能基因组学，癌症基因组学等研究的深入展开，至今，我们已有可能在基因水平上做更精确的早期诊断，在癌变前期或癌细胞形成(单克隆时)就能做到基因水平的早期预测诊断。本发明采用核酸原位杂交技术，检测HURP基因的表达变化，对临床上早期基因水平预测前列腺癌等的发生有非常重要的临床意义。

本发明采用的原位杂交技术(in situ hybridization)是将分子生物学与细胞化学技术结合起来，以标记的核酸分子为探针，在组织细胞原位检测特异性核酸分子的技术。其原理是使含有特异序列、经过标记的核酸单链(即探针)，在适宜条件下与组织细胞中的互补核酸单链即靶核酸发生杂交，再以放射自显影或免疫细胞化学方法对标记探针进行探测，从而在细胞原位显示特异的DNA或RNA分子。

【发明内容】

本发明的目的是针对现有技术中的不足，提供一种HURP基因的原位杂交检测试剂盒的用途。

本发明的再一的目的是，提供一种HURP基因的原位杂交检测试剂盒。

本发明的另一的目的是，提供一种HURP基因的原位杂交检测方法。

为实现上述目的，本发明采取的技术方案是：