[发明专利]蓝萼甲素酸酯衍生物及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种蓝萼甲素酸酯衍生物，其特征在于，是一种贝壳杉烷型四环二萜类物质，具有贝壳杉烷型结构、羰基和羟基，是蓝萼甲素与羧酸的酯化物，其分子结构的通式如下：

其中，R1为丁二酸取代基-C4H5O4、戊二酸取代基-C5H7O4、丁二酸的甘氨酸衍生物取代基-C6H8NO5、戊二酸的甘氨酸衍生物取代基-C7H10NO5或-OH，R2为丁二酸取代基-C4H5O4、戊二酸取代基-C5H7O4、丁二酸的甘氨酸衍生物取代基-C6H8NO5、戊二酸的甘氨酸衍生物取代基-C7H10NO5或-OH，R1和R2中至少有一个为-OH。

2.如权利要求1所述的蓝萼甲素酸酯衍生物，其特征在于，所述R1为-C4H5O4、所述R2为-OH，或者所述R1为-OH、所述R2为-C4H5O4，其分子结构分别如下：

3.如权利要求1所述的蓝萼甲素酸酯衍生物，其特征在于，所述R1为-C5H7O4、所述R2为-OH，或者所述R1为-OH、所述R2为-C5H7O4，其分子结构分别如下：

4.如权利要求1所述的蓝萼甲素酸酯衍生物，其特征在于，所述R1为-C6H8NO5、所述R2为-OH，或者所述R1为-OH、所述R2为-C6H8NO5，其分子结构分别如下：

5.如权利要求1所述的蓝萼甲素酸酯衍生物，其特征在于，所述R1为-C7H10NO5、所述R2为-OH，或者所述R1为-OH、所述R2为-C7H10NO5，其分子结构分别如下：

6.一种如权利要求1所述的蓝萼甲素酸酯衍生物的制备方法，其特征在于，包含以下步骤：

步骤1：提取

步骤1.1：取香茶菜药材(地上部分)粉碎至20目～50目；

步骤1.2：将所得的粉碎物与95％乙醇(A.R.)按照体积比1∶5～1∶15混合，加热，在80℃～90℃温度条件下回流1～2小时，提取、过滤，得到提取液和剩余物；

步骤1.3：将步骤1.2所得的剩余物与95％乙醇(A.R.)按照体积比1∶5～1∶15混合，加热，在80℃～90℃温度条件下回流1～2小时，提取、过滤，得到提取液和剩余物，重复该步骤1～3次；

步骤1.4：合并步骤1.2和1.3所得的提取液；

步骤2：溶剂处理

步骤2.1：将步骤1所得的提取液加热，在55℃～65℃温度条件下加热减压浓缩，回收乙醇并得到粘稠的初级浓缩物；

步骤2.2：将步骤2.1所得的初级浓缩物与水按照体积比1∶8～1∶10混合，在室温条件下以60～120转/分的速度搅拌10分钟，随后静置6～12小时，弃去上清液得到下层固体；

步骤2.3：将步骤2.2所得的固体与乙酸乙酯(A.R.)按照体积比1∶4～1∶6混合，在25℃～35℃温度条件下以60～120转/分的速度搅拌溶解，静置1～3小时，过滤得到滤液和不溶物；

步骤2.4：将步骤2.3所得的不溶物与乙酸乙酯(A.R.)按照体积比1∶4～1∶6混合，在25℃～35℃温度条件下以60～120转/分的速度搅拌溶解，静置1～3小时，过滤得到滤液和不溶物，重复该步骤1～3次；

步骤2.5：合并步骤2.3和2.4所得的滤液；

步骤2.6：将步骤2.5所得的滤液加热，在35℃～45℃温度条件下加热减压浓缩，回收乙酸乙酯(A.R.)，得到固体浓缩物；

步骤3：树脂处理

步骤3.1：将步骤2所得的固体浓缩物与95％乙醇(A.R.)按照体积比1∶4～1∶6混合溶解，得到溶液；

步骤3.2：将步骤3.1所得的溶液缓慢加到7号树脂柱中，起观察树脂的颜色，在树脂柱有2/3变色时，停止加样，并采用200ml～400ml的95％乙醇(A.R.)冲洗该树脂柱，收集所有流出液，所述树脂柱的填充物为强碱性阴离子树脂并用氢氧化钠饱和至pH值中性；

步骤3.3：将步骤3.2所得流出液加热，并在55℃～65℃温度条件下加热减压回流，直至溶剂干，得到固体残留物；

步骤4：重结晶

步骤4.1：将上述残留物与30℃～40℃的极性溶剂按照体积比1∶4～1∶6混合，得到初级溶液，加热，在30℃的～40℃温度条件下减压浓缩，在-23℃～-13℃温度条件下静置析晶，过滤得到浅黄色针状结晶；

所述极性溶剂为按照体积比1∶1～1∶2混合的氯仿(A.R.)和丙酮(A.R.)的混合溶液；

步骤4.2：将步骤4.1所得的结晶与极性溶剂按照体积比1∶4～1∶6混合，在-23℃～-13℃温度条件下反复重结晶2～4次，每次12～24小时，得到中间产物蓝萼甲素；

所述极性溶剂为按照体积比1∶1～1∶4混合的氯仿(A.R.)和丙酮(A.R.)的混合溶液；

步骤5：衍生化

将步骤4所得蓝萼甲素溶于四氢呋喃(THF)中，在室温下，加入丁二酸或戊二酸和4-二甲氨基吡啶(DMAP)，室温下搅拌，减压蒸馏除去四氢呋喃，随后采用乙酸乙酯萃取得到有机相，蒸去溶剂干燥得到蓝萼甲素酸酯及其衍生物。