[发明专利]一种细胞周期检查点调控蛋白用作检测肝细胞癌的蛋白质分子标记的应用

说明书

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体地说，涉及一种细胞周期检查点调控蛋白用作检测肝细胞癌的蛋白质分子标记的应用。

背景技术

肝细胞癌是世界范围内第四位常见的恶性肿瘤，也是我国第二位常见恶性肿瘤，每年大约有250,000名患者死于肝细胞癌。肝细胞癌恶性程度高，容易复发和转移，预后差，而且早期诊断较困难，往往延误了最佳治疗时期。但由于西方发达国家肝癌的发病率较低，国际上对肝癌的基础研究仍较为薄弱，而我国是肝癌高发国家，发病率和死亡率呈现上升趋势，且发病年龄构成年轻化，每年用于肝癌治疗的医疗支出大为增加，肝癌成了严重危害我国人民生命财产安全的头号敌人，并且是影响社会经济发展的一个重要因素，因此，加大力度进行我国肝癌的基础研究具有战略意义，而分离和鉴定新的肝癌相关基因是目前肝癌基础研究中的前沿课题。

到目前为止，已有不下20种的基因异常表达被确定与肝癌的发生发展有关，但已确定的肝癌相关基因在肝癌中的异常表达率并不高，肝癌的发病机制至今仍未阐明，肝癌的早期诊断率仍有待提高。此外，传统的肝癌手术加化疗以及近年来配合使用的多种基因治疗方法仍没有明显提高肝癌患者的生存率，因而寻找新的肝癌相关基因、尤其是肝癌高表达基因对于探讨肝癌的发病机制具有重要意义。

因此，研究和开发在肝细胞癌中高表达的基因和/或蛋白质具有重要意义，寻找新的在肝细胞癌中高表达的基因和/或蛋白质也具有迫切需要性。

Rad9A蛋白(Cell cycle checkpoint control protein RAD9A，hRAD9A，EC＝3.1.11.2，DNArepair exonuclease Rad9A homolog A)的NCBI登录号为NP_004575，Swissprot登录号为Q99638，IPI号为IPI00005277.4(human3.28 version)。Rad9A的一个主要功能是提高细胞对DNA损伤的抗性并维持基因组的完整性。这与Rad9A参与以下生理过程有关：参与构成Rad9A-Rad1-Hus1复合物，调控细胞周期检测点；参与修复DNA损伤，主要是碱基切除修复(base excision repair)；参与维持端粒的稳定。Rad9A还参与细胞凋亡：DNA损伤促使Rad9A被caspase 3剪切，产生的N端片段从细胞核转移到细胞质，随后与抗凋亡的Bcl-XL蛋白结合而抑制其功能，从而促进凋亡。另外，Rad9A还具有以下功能：反式激活目标基因、3’-5’核酸外切酶活性、抑制雄性激素受体的反式激活活性以及参与核糖核苷酸的合成等(http://www.uniprot.org/uniprot/Q99638)。在Rad9A蛋白的387位的丝氨酸残基上发生磷酸化获得的蛋白即为Phospho-Rad9A-S387。

另外，有少量研究显示，Rad9A蛋白与部分癌症相关，如Cheng等在48例乳腺癌样本中发现有25例乳腺癌样本中Rad9A的mRNA水平显著上调，但没有1例乳腺癌样本中Rad9A的mRNA水平显著下调(The cell cycle checkpoint gene Rad9A is a novel oncogene activatedby 11q13 amplification and DNA methylation in breast cancer.Cancer Res 2005，65，(19)，8646-54)；随后，Kebebew等证实在甲状腺癌中Rad9A的mRNA水平显著上升(Diagnosticand prognostic value of cell-cycle regulatory genes in malignant thyroid neoplasms.World JSurg 30(5)：767-74)；Zhu等发现前列腺癌细胞系中Rad9A的表达水平较正常的前列腺细胞系显著升高(Rad9A has a functional role in human prostate carcinogenesis.Cancer Res 68(5)：1267-74)；Maniwa等证实Rad9A的表达水平在部分非小细胞肺癌样本中显著升高，同时发现Rad9A存在过度磷酸化现象(Accumulation of hRad9A protein in the nuclei of nonsmall celllung carcinoma cells.Cancer 103(1)：126-32)。

但是到目前为止，现有文献中未见有Rad9A，特别是Phospho-Rad9A-S387，与肝细胞癌的相关性的报道。