[发明专利]一种真菌硫氧还蛋白的多肽、编码序列及制备方法和应用无效
申请号: | 200910060873.0 | 申请日: | 2009-02-27 |
公开(公告)号: | CN101497886A | 公开(公告)日: | 2009-08-05 |
发明(设计)人: | 孙慧;梁一;陈义杰;刘洪洪;栾荣;车涛;姜帅 | 申请(专利权)人: | 武汉大学 |
主分类号: | C12N15/53 | 分类号: | C12N15/53;C12N9/02;C12N15/70;C12P21/02;A61K38/44;A61P35/00;C12R1/19;C12R1/645 |
代理公司: | 武汉宇晨专利事务所 | 代理人: | 王敏锋 |
地址: | 43007*** | 国省代码: | 湖北;42 |
权利要求书: | 查看更多 | 说明书: | 查看更多 |
摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 真菌 硫氧还蛋白 多肽 编码 序列 制备 方法 应用 | ||
1.一种分离的编码真菌硫氧还蛋白的核苷酸,其序列为SEQ ID NO.1所示核苷酸序列。
2.一种分离的多肽,其序列为SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列。
3.权利要求2所述的一种真菌硫氧还蛋白的多肽制备方法,它包括下列步骤:
A、提取杨树菇的总RNA或mRNA为模板,通过RT-PCR得到cDNA第一链,以此链为PCR模板,扩增得到序列为SEQ ID NO.1所示的全长序列;
B.酶切步骤A得到的序列和原核表达载体,构建重组表达载体;
C、将步骤B中得到的重组表达载体转化大肠杆菌宿主细胞,形成表达杨树菇硫氧还蛋白的重组细胞;
D、将步骤C中得到的重组细胞在37℃培养过夜获得饱和培养物,将50μL饱和培养物接种于5mL含氨苄青霉素100μg/mL的培养基中,于37℃培养2小时,取1mL培养物转移至微量离心管中,加异丙基硫代半乳糖苷IPTG至终浓度为1mmol/L,对培养物进行诱导,诱导10小时;
E、利用Ni2+亲和层析法纯化蛋白,分离,纯化步骤D中在重组细胞中表达的多肽。
4.权利要求2所述的一种分离的多肽在制备治疗或预防宫颈癌药物中的应用。
5.权利要求2所述的一种分离的多肽在制备治疗或预防胃癌药物中的应用。
6.权利要求2所述的一种分离的多肽在制备治疗或预防乳腺癌药物中的应用。
7.权利要求2所述的一种分离的多肽在制备治疗或预防直肠癌药物中的应用。
8.权利要求2所述的一种分离的多肽在制备治疗或预防前列腺癌药物中的应用。
9.权利要求2所述的一种分离的多肽在制备治疗或预防肝癌药物中的应用。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息,商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于武汉大学,未经武汉大学许可,擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作,请联系【客服】
本文链接:http://www.vipzhuanli.com/pat/books/200910060873.0/1.html,转载请声明来源钻瓜专利网。